詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:副流感病毒Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
輪狀病毒(B組)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
輪狀病毒(C組)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
輪狀病毒A組、B組和C組PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
輪狀病毒A組PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
輪狀病毒A組和星狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
使用方法:
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,,下同),。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
4. 換槍頭,,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管,。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照,。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色,、組織切片、組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
天冬酰胺酶ELISA試劑盒 ASPGRat catecholamine, CA Elisa Kit
天冬酰胺氨基葡萄糖酶ELISA試劑盒 AGARat Ierleukin 23, IL-23 Elisa Kit
天冬氨suan酰酶3ELISA試劑盒 ACY3Rat cardiotrophln 1, CT-1 Elisa Kit
天冬氨suan甲氨酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 ATCaseRat ai-alpha-Fodrin IgG/IgA, α-Fodrin IgG/IgA Elisa Kit
天冬氨suanβ羥化酶ELISA試劑盒 ASPHRat lipoprotein α, Lp-α Elisa Kit
特異性巨噬細(xì)胞武裝因子ELISA試劑盒 SMAFRat coagulation factor Ⅷ related aigen, FⅧ-Ag Elisa Kit
特異性蛋白1ELISA試劑盒 Sp1Rat Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa KitRat Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa Kit
糖脂抗體ELISA試劑盒 glycolipidRat coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa Kit
糖盞蛋白ELISA試劑盒 GCRat von Willebrand Factor, vWF Elisa Kit
糖原合成酶激酶3ELISA試劑盒 GSK-3Rat plasmin-aiplasmin complex, PAP Elisa Kit
糖原蛋白2ELISA試劑盒 GYG2Rat thrombin-aithrombin complex, TAT Elisa Kit
糖原蛋白1ELISA試劑盒 GYG1Rat ai-thrombin receptor, ATR Elisa Kit
糖醛基-2-磺基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 USTRat thrombin receptor, TR Elisa Kit
糖磷脂酰肌醇ELISA試劑盒 GPIRat cardiac troponin Ⅰ, c-Ⅰ Elisa Kit
副流感病毒Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒十二烯suan基δ異構(gòu)酶(DCI)重組蛋白R(shí)ecombina Dodecenoyl Coenzyme A Delta Isomerase (DCI)
酰基合成酶長(zhǎng)鏈家族成員4(ACSL4)重組蛋白R(shí)ecombina Acyl Coenzyme A Syhetase Long Chain Family, Member 4 (ACSL4)
含烯酰水合酶短鏈1(ECHS1)重組蛋白R(shí)ecombina Enoyl Coenzyme A Hydratase Short Chain 1, Mitochondrial ?