詳細介紹
試劑盒內(nèi)包含了ELISA實驗所需的所有試劑和相關(guān)組份。簡單快捷的方案設計和優(yōu)化的試劑配比,,為科研工作者提供ELISA實驗分析方案,。
試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑,操作簡單便捷,;試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實驗優(yōu)化,,確保更高的檢測靈敏度
產(chǎn)品名稱:Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒說明書
英文名稱:AGRP ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
分析類型:夾心ELISA
樣本類型:血清、血漿,、細胞上清等液體樣本
產(chǎn)品型式:96孔板,可拆
貯存方法:試劑盒未拆開,,4℃保存,。已拆開,標準品-20℃保存,,其它4℃保存,。
運輸條件:4℃?
組成:
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1瓶
8 標準品 0.5ml×1瓶
9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2張
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速 小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
樣本要求
1.樣本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人肺鱗狀癌細胞,;NCI-H226Cystatin A 胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑A抗體100 ul
人源口腔鱗狀細胞癌細胞系,;TSCC1Cystatin C/CST3 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制劑C抗體20 ul
肝癌細胞株 ;HepG2/TC155Cystatin B 胱抑素B/半胱氨酸蛋白酶抑制劑B抗體100 ul
人肺腺癌細胞,;ZRLC-1PRODH 脯氨酸脫氫酶抗體100 ul
人舌癌細胞系,;CTSC-3RAIDD CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體100 ul
胃癌二甲雙胍耐藥細胞株;BGC823/二甲雙胍Cytoglobin 細胞球蛋白抗體100 ul
肝癌細胞株,;LM3CYLD 微管結(jié)合蛋白CYLD抗體100 ul
人卵巢癌細胞,;OV3R-PTXphospho-CYLD(Ser418) 磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體20 ul
人卵巢癌細胞;SK3R-PTXCYP1A1 細胞色素P450 1A1抗體100 ul
人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株,;7SuRP450 1A2/CYP1A2 細胞色素P450 1A2抗體100 ul
人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株,;ACSuCYP11A1/P450SCC 細胞色素P450 11A1抗體20 ul
人肝內(nèi)膽管癌細胞系;LICCFCYP2C9 細胞色素P450 2C9抗體100 ul
人肝癌細胞系,;HCCIH01CYP11B1 細胞色素P450 11B1抗體20 ul
人肝癌細胞系,;HCCIH02Cytochrome P450 2D1 細胞色素CYP2D1抗體100 ul
人肝癌細胞系;HCCIH03CYP3A4 細胞色素P450 3A4抗體100 ul
人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株,;ACSuRCYP3A1 細胞色素P450 3A1抗體20 ul
曲妥珠單抗(赫塞?。┠退幍娜税┘毎?/font>BT-474/HRCYP4A1 細胞色素P450 4A1抗體100 ul
人肝癌細胞株;Huh-7/F24CYP5A1/Thromboxane synthase 血栓素合成酶抗體20 ul
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒說明書ELK1/FITC 熒光素標記細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG
Endo G /FITC 熒光素標記核酸內(nèi)切酶GIgG
Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC 熒光素標記兔抗、大,、細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG
Emp1/FITC 熒光素標記表皮膜蛋白1IgG
Endostatin/FITC 熒光素標記內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁IgG
envelope glycoproin Yellow fever virus/FITC 熒光素標記抗黃熱病毒包膜糖蛋白IgG
Beta-endorphin/FITC 熒光素標記、大,、、羊,、牛beta內(nèi)啡肽IgG
ENPP1/PC-1/FITC 熒光素標記抗核苷酸內(nèi)焦酸酶/酸二酯酶1IgG
EGFL7/FITC 熒光素標記抗脈管發(fā)育(組裝)蛋白IgG
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋,。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。
7.溫育:操作同3,。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。