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人乳頭瘤病毒高危型PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-04-13 08:52:16瀏覽次數(shù):257

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實驗
規(guī)格 50T 分類 PCR檢測試劑盒
保存條件 -20℃避光保存    
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詳細介紹

服務(wù)流程:

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

中文名稱

人乳頭瘤病毒高危型PCR檢測試劑盒

英文名稱


產(chǎn)品規(guī)格

50T

保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。

儲存條件:

僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

1.jpg

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實驗過程:

一、試劑準備

二,、操作步驟

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM

5.Taq酶

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。

3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。

實驗注意事項:

1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;

2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。

主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。

主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR。

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