詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產品名稱 | |
英文名稱 | Radix cynanchi atrati |
貨號 | BJ-P988403 |
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,,經過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達到100%,。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程,。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,,除TIANDZ公布的序列外,,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果,。
半邊蓮(標準品)英文名稱: Triton X-405產品別名: 4-甲硫基乙酯
半甘草異黃酮B英文名稱: Urinary trypsin inhibitor fragment產品別名: 4-乙酸乙酯
半夏(標準品)英文名稱: Zinc oxide產品別名: 六鈷酸鋅
半枝蓮(標準品)英文名稱: 4(5)-Methylimidazole產品別名: 鹽酸奧洛他定
寶藿苷I,羊藿次苷II(標準品)英文名稱: Aluminum hydroxide產品別名: 1-(N-Boc-氨乙基)哌
寶藿苷II;大花羊藿苷A,;意卡瑞苷A(標準品)英文名稱: Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate產品別名: 4-脲
寶藿苷V英文名稱: Barium carbonate產品別名: 乙二四乙酸銅鈉二水合物
寶藿苷VII英文名稱: Benzamide產品別名: 苯基胍碳酸鹽
杯莧甾酮(標準品)英文名稱: Biebrich scarlet產品別名: 5-甲基-2-呋喃
北蒼術(標準品)英文名稱: Calcium citrate, tetrahydrate產品別名: 2,2-二甲基-3-羥基酸甲酯
北豆根(標準品)英文名稱: Cesium sulfate產品別名: 2-甲氧基-4-甲基嘧啶
北美芹素英文名稱: Copper sheet產品別名: 4-溴代巴豆酸
MS4A15蛋白抗體 Gabapentin Related Compound E 質量規(guī)格:10μg/ml,u=5%
四度跨膜蛋白3抗體 Gabapentin Related Compound D 質量規(guī)格:分析標準品
黑色素瘤相關抗原12抗體 6,7,8,9 Dehydro Paliperidone Hydrochloride 質量規(guī)格:分析標準品
黑色素瘤相關抗原2抗體 Paliperidone N-Oxide 質量規(guī)格:≥98.0%(HPLC),分析標準品
黑色素瘤相關抗原5抗體 Paliperidone-d4 質量規(guī)格:Standard for GC,≥99%(HPLC)
同源盒基因Msx2抗體 Ciprofloxacin lactate 質量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(HPLC)
磷酸化雙微體2癌基因抗體 Formyl Ciprofloxacin 質量規(guī)格:用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)
磷酸化雙微體2癌基因抗體 Decarboxy Ciprofloxacin 質量規(guī)格:農殘級
三聚單克隆抗體 Ciprofloxacin-d8, Hydrochloride 質量規(guī)格:250-125um
白薇探針法PCR鑒定試劑盒圖片腸炎沙門氏菌Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
大腸桿菌Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit用途: 教學科研,,構建大腸桿菌染色體確實菌株的出發(fā)菌株。
弗氏志賀氏菌Human GPT2(Alanine aminotransferase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Shigella flexneri
地衣芽胞桿菌Human EPB42(Erythrocyte membrane protein band 4.2) ELISA Kit用途: 飼料添加劑菌
產色鏈霉菌Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces chromogenes
黃曲霉Human SESN3(Sestrin-3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus Link
蠟狀芽孢桿菌Human CTSK(Cathepsin K) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
尖孢鐮刀菌Human SERPINH1(Serpin H1) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
假單胞菌屬Human MAT1A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp
PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果,。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線,。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,,提高HER2基因擴增檢測的可靠性,。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。