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產品名稱：N2添加劑細胞

英文名稱：N2

貨號：BJ-01X10061

規(guī)格：5ml

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布,；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）,；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；

5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

豬前列腺素內過氧化物合2(PTGS2/COX-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磷烯單鹽疊氮磷二苯酯  97% 化銣 AR,99.5%

豬肌鈣蛋白T(Tn-T)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 磷烯三環(huán)已鹽二苯次膦酰 98%碳銣 99.8% metals basis

豬熱休克蛋白40(HSP-40)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 6-溴乙代磷二苯酯 97%氟化銣 AR

豬性唾液脯氨豐富蛋白1(PRB1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 6-溴乙衣康 AR,99.8%化銣 99.9%

豬胎蛋白異質體3(AFP-L3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 四銨衣康 CP，99%硫銣 99.99% metals basis

豬前列腺素D合成(PGDS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒四溴銨2-萘乙 99%硫銣  99.9% metals basis

豬蛋白激活受體2(PAR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒四銨1-萘 95%硫銣  99.0%

豬前列腺素E受體3(EP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒吩乙硫鹽2-萘 98%銣標準溶液 1000μg/ml

豬小表皮粘蛋白(SBEM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒5-氨頡草1-萘 97%二氧化硅 輕質AR,99.5%

豬骨成型蛋白受體II(BMPR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-氨頡草菲醌 95%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:5μm

豬核孔蛋白62KDa(NUP62)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-羥丁菲醌 99%二氧化硅 GR

豬內皮素轉化1(ECE1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-羥丁2-吡啶 99%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:10μm

豬磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒β-內酯(R)-(+)-2-(4-羥苯氧) 98%二氧化硅 SP

豬白分化抗原CD42 (CD42)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒吡硫鎓鈉(S)-(-)-2-酯 98%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:2μm

豬粘蛋白4(MUC4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒吡硫鎓鈉3,5-二叔丁 98%二氧化硅標準溶液 1000μg/ml

豬核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒吡硫鎓鈉乳糖,，無水 AR,98%二氧化硅標準溶液 100mg/L,，體:0.05%Na2CO3
N2添加劑細胞肌側索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體白介素5(IL-5)檢測試劑盒IL-5

ATPH+轉運溶體輔助蛋白2抗體白介素4(IL－4)檢測試劑盒IL－4

肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體白介素4(IL-4)檢測試劑盒IL-4

核突觸蛋白抗體白介素35(IL-35)檢測試劑盒IL-35

β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內參抗體）白介素33(IL-33)檢測試劑盒IL-33

β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體白介素31(IL-31)檢測試劑盒IL-31

β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體白介素3(IL-3)檢測試劑盒IL-3

β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體白介素2受體β(IL2rb/CD122)檢測試劑盒IL2rb/CD122

激活素受體2A抗體白介素2受體(IL-2R)檢測試劑盒IL-2R
操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管,，加入8mL預熱培養(yǎng)基,。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯,，裝滿37℃的水,，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）,。輕輕晃動凍存管,，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）,。注意凍存管管口不能沒入水中,，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,，將管內細胞轉移至準備好的離心管內,，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散,，降低DMSO濃度,，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,，均轉移至離心管內,。

4）800rpm離心5min，棄上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，吹打制成細胞懸液,。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,，放入溫箱內培養(yǎng),。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞,。繼續(xù)培養(yǎng),，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗,。