詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務,。
中文名稱 | 狄斯瓦螨PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Varroa destructorPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
相關(guān)產(chǎn)品:
黃頭病毒RT-PCR試劑盒
黃頭病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
黃頭桿狀病毒PCR檢測試劑盒
黃頭桿狀病毒PCR檢測試劑盒
灰馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白MELISA試劑盒 hnRNP MHuman muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒 hnRNP Khuman inhibin beta-B, Inhbb Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白IELISA試劑盒 hnRNP I/PTBHuman Orexin receptor, OXR Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白HELISA試劑盒 hnRNP HHuman growth hormone releasing peptide-Ghrelin, GHRP-Ghrelin Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白GELISA試劑盒 hnRNP GHuman calmodulin, CAM Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒 hnRNP EHuman true insulin, TI Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白DELISA試劑盒 hnRNP DHuman Noradrenaline Bitartas, NE-B Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白CELISA試劑盒 hnRNP CHuman prostacycline, PGI Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3ELISA試劑盒 hnRNP A3Human Procalcitonin, PCT Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1ELISA試劑盒 hnRNP A2/B1Human ReverseTri-iodothyronine, rT3 Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1ELISA試劑盒 hnRNP A1Human 6-keto-prostaglandin F1a, 6-K-PGF1a Elisa Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0ELISA試劑盒 hnRNP A0Human Peosidine Elisa Kit
異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體ELISA試劑盒 hnRNP/RA33Human metanephrine, MN Elisa Kit
異質(zhì)核糖核蛋白QELISA試劑盒 SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1Human Dopamine D1 receptor, D1R Elisa Kit
狄斯瓦螨PCR檢測試劑盒碳suan酐酶Ⅵ(CA6)重組蛋白Recombina Carbonic Anhydrase VI (CA6)
過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白Recombina Peroxiredoxin 5 (PRDX5)
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白Recombina High Temperature Requireme Factor A1 (HTRA1)
非ATP酶體26S亞基13(PSMD13)重組蛋白Recombina Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 13 (?