詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達差異分析、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 皮諾卡菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Nocardia farcinicaPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
相關(guān)產(chǎn)品:
鮭魚立克次氏體PCR檢測試劑盒
諾氏瘧原蟲PCR檢測試劑盒
瘧原蟲PCR檢測試劑盒
豬圓環(huán)病毒通用PCR檢測試劑盒
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一,、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit人胃抑素(GIP)試劑盒ELISA
ai-UACA aibody IgG ELISA Kit人胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)試劑盒ELISA
ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNRNP70)aibody ELISA kit人胃粘液素(GM)ELISA檢測試劑盒
ai-sp100-aibody ELISA Kit人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒
Sc1-70 Aibody,Sc1-70-Ab ELISA Kit人蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)ELISA試劑盒
ai-Q fever aibody,ai-Q-Ab ELISA Kit人蝸牛同源物2(SNAI2)elisa試劑盒
ai-Mi2-aibody ELISA Kit人蝸牛同源物2(SNAI2)試劑盒 ELISA
ai-Ku-aibody ELISA Kit人烏頭suan酶2(ACO-2) ELISA試劑盒
ai-IgA aibody ELISA Kit人烏頭suan酶2(ACO-2)ELISA檢測試劑盒
ai-G2s aibody IgG ELISA Kit人無花果酶2(FCN2)檢測試劑盒elisa
ai-Epstein-Barr virus aibody,,EBV ELISA Kit人五聚素3(PTX3)試劑盒ELISA
ai E3 ubiquitin-protein ligase TRIM21(TRIM21)aibody ELISA kit人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)ELISA試劑盒
皮諾卡菌PCR檢測試劑盒胱天7(CASP7)重組蛋白Recombina Caspase 7 (CASP7)
胱天7(CASP7)重組蛋白Recombina Caspase 7 (CASP7)
4(KLK4)重組蛋白Recombina Kallikrein 4 (KLK4)
4(KLK4)重組蛋白Recombina Kallikrein 4 (KLK4)
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