詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達差異分析、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 肝片吸蟲PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Fasciola hepaticaPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
腦粘體蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
黏孢子蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肝 壞死性細菌探針法熒光定量PCR試劑盒
淋病奈瑟菌探針法熒光定量PCR試劑盒
實驗過程:
一,、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
Human Podocalyxin, PCX Elisa Kit人Ⅳ型膠原(ColⅣ)elisa試劑盒
Human breast cancer susceptibility protein 1, BRCA-1 Elisa Kit人Ⅳ型前膠原氨基末端肽(PⅣNP)ELISA試劑盒
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Human Argyrophilic nucleolar organizer region proteins, Ag-NORs Elisa Kit人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)試劑盒 ELISA
Human Thioredoxin, Trx Elisa Kit人ADP-核糖基化因子4(ARF4)試劑盒ELISA
Human Caveolin-1, Cav-1 Elisa Kit人ADP-核糖基化因子5(ARF5)ELISA試劑盒
Human common acute lymphocytic leukaemia aigen, CALLA Elisa Kit人Adropin(ENHO)ELISA檢測試劑盒
Human melanocyte stimulating hormone, MSH Elisa Kit人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)試劑盒ELISA
Human epidermal keratin, EK Elisa Kit人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒
Human cytokeratin fragme aigen 21-1, CYFRA21-1 Elisa Kit人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒
Human carbohydrate-deficie transferrin, CDT Elisa Kit人alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgG抗體ELISA試劑盒
Human desmogleins 1, DGS-E1 Elisa Kit人Alpha-D 生育酚/維生素E(Alpha-D TPL)檢測試劑盒elisa
肝片吸蟲PCR檢測試劑盒血鋅濃度測試盒/微量法100T/96S
血鋅濃度測試盒/分光光度法50管/48樣
血鋅濃度比色法檢測試劑盒離子系列100管/96樣微量法
血糖含量測試盒/微量法100管/96樣
血糖含量測試盒/分光光度法50管/48樣