我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買(mǎi)到貨后,,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,*進(jìn)口來(lái)源,,*保證5代以內(nèi),活力>95%,,無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱:骨髓巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:5×105
貨號(hào):BJ-01X1888
產(chǎn)品類(lèi)型:原代細(xì)胞
單位:T25/瓶
提供細(xì)胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
大鼠類(lèi)胰蛋白(TPS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚苯乙烯樹(shù)脂γ -丁內(nèi)酯 -丁內(nèi)酯(GBL) CP四苯錫 97%
大鼠環(huán)磷腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Rink-Amide樹(shù)脂γ -丁內(nèi)酯 ≥99%, FCC二氫化鈦 -325目,99%
大鼠周期蛋白依賴性激5(CDK5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Rink Amide AM樹(shù)脂γ -丁內(nèi)酯 >99.9% (GC)氮化鉭 5 μm,99.5% metals basis
大鼠周期蛋白依賴性激9(CDK9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三苯樹(shù)脂二二 AR10-十一烯 98%
大鼠周期素依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒王樹(shù)脂二二 CP十一 98%
大鼠周期素D1(CCND1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒多巴鹽鹽芐三氫氧化銨 40%溶液十一 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)
大鼠周期素D2(CCND2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒多巴鹽鹽四氫氧化銨 五水合物 97%十一 Standard for GC, ≥99.0% (GC)
大鼠周期素D3(CCND3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒多巴鹽鹽鈣 CP,98.0% 環(huán)氧丁烷 98%
大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CYPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-N-三苯-D-半胱氨鈣 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-乙酰苯 97%
大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CYPB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-N-三苯-D-半胱氨L-(-)樟腦磺 99%2-乙烯萘 97%
大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素D(CYPD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-S-乙酰氨-L-半胱氨D(+)樟腦磺 99%4-乙烯吡啶 96%
大鼠β肌動(dòng)蛋白 (β-actin)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-S-乙酰氨-L-半胱氨胸腺嘧啶 99%紫脲 97%
大鼠胱抑素C(Cys-C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-S-乙酰氨-L-半胱氨胸腺嘧啶 99%,用于培養(yǎng)乙烯三硅烷 97%
大鼠胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-N-三苯-L-組氨天青I Biological stain4-乙烯苯 98%
大鼠色素b-561(CYB561)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰-N-三苯-L-組氨天青I 94%占噸氫 99%
大鼠成纖維生長(zhǎng)因子7(FGF7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒芴氧羰酰-N--L-纈氨天青Ⅱ Biological stain鄰二苯 Standard for GC,≥99% (GC)
骨髓巨噬細(xì)胞多能發(fā)育相關(guān)因2抗體鹽非那吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Repaglinide
結(jié)腸直腸癌缺失因抗體鹽非索非那定(標(biāo)準(zhǔn)品) Repaglinide
多巴脫羧抗體鹽芬戈莫德(標(biāo)準(zhǔn)品) D-(-)-Arabinose
防御素β1/Defensin β1抗體鹽酚芐明(標(biāo)準(zhǔn)品) D-arabinose
抗體鹽呋喃它(標(biāo)準(zhǔn)品) Ferulic acid
DLX4抗體鹽氟靜(標(biāo)準(zhǔn)品) Ferulic acid
DTX1抗體鹽氟桂利(標(biāo)準(zhǔn)品) Punicalagin (40%)
絲裂原活化蛋白激磷-1抗體鹽氟?。?biāo)準(zhǔn)品) Punicalagin
絲裂原活化蛋白激磷-2抗體鹽氟雜質(zhì) C(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosiglitazone HCL
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱,;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),,再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中),。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃),。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染,。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),,將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,,使細(xì)胞均勻分散,,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡,。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,,棄上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液,。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng),。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞,。繼續(xù)培養(yǎng),,待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),。