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貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-04-07 10:00:55瀏覽次數(shù):169

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應用領域 環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實驗
英文名稱 DobravaBelgrade Virus PCR 規(guī)格 50T
分類 PCR檢測試劑盒 保存條件 -20℃避光保存
貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒的相關產(chǎn)品:海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus iniaePCR輕型鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus mitisPCR變異鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus mutansPCR口腔鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus oralisPCR唾液鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus salivariu

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:貝爾格萊德病毒型PCR檢測試劑盒
英文名稱:DobravaBelgrade Virus PCR

規(guī)格:50T

分類:PCR檢測試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融。

公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片,、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip  EMSA,、CHIP、熒光,、ELISA

6.病理檢測:HE染色,、特殊染色、組織切片,、組化,、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS,、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型、動物模型構(gòu)建
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PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix (2mM)

4 μl     引物1(10pM)

2 μl     引物2(10pM)

2 μl     Taq酶 (2U/μl)

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

1 μl      加ddH2O至 50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。

2:調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min。

3:PCR試劑盒結(jié)束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μl進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。

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使用方法:
一,、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,下同),。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
4. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品,。放冰上待用。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三,、設置 qPCR 反應(20μL 體系,,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線,。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照,。


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