化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞,、血液,、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求,，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況,；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰,，也可以保存于Trizol液中,。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析,。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì),、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 貝巴魯病毒PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Bebaru Virus(BEBV)RTPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
相關(guān)產(chǎn)品：
立克次體通用PCR檢測試劑盒Rickettsia spp.PCR
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒Rickettsia tsutsugamushiPCR
鴨疫里默氏桿菌PCR檢測試劑盒Riemerella anatipestiferPCR
裂谷熱病毒PCR檢測試劑盒Rift Valley Fever Virus(RVFV)RTPCR
羅西奧病毒PCR檢測試劑盒Rocio VirusRTPCR
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測,，請按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Human von Willebrand Factor, vWF Elisa Kit大鼠白介素9(IL-9)ELISA檢測試劑盒
Human plasmin-aiplasmin complex, PAP Elisa Kit大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
Human thrombin-aithrombin complex, TAT Elisa Kit大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
Human ai-thrombin receptor, ATR Elisa Kit大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
Human thrombin receptor, TR Elisa Kit大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒
Human Factor Ⅷ-related Aigen, FⅧAg Elisa Kit大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒
Human Fibrinogen, Fbg Elisa Kit大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA Kit
Human major histocompatibility complex Ⅰ, MHCⅠ/HLAⅠ Elisa Kit大鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒ELISA
Human Ai-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa Kit大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒elisa
Human thrombus precursor protein, TpP Elisa Kit大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 ELISA
Human lymphocyte function associated aigen 3, LFA-3 Elisa Kit 大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA檢測試劑盒
Human major histocompatibility complex Ⅲ, MHCⅢ/HLA-Ⅲ Elisa Kit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
貝巴魯病毒PCR檢測試劑盒土壤suan性轉(zhuǎn)化酶（SAI）比色法檢測試劑盒土壤系列100管/48樣微量法
土壤suan性轉(zhuǎn)化酶（SAI）比色法檢測試劑盒土壤系列50管/24樣可見分光光度法
土壤β木糖苷酶（ SβXYS）比色法檢測試劑盒土壤系列100管/48樣微量法
土壤β木糖苷酶 （SβXYS）比色法檢測試劑盒土壤系列50管/24樣可見分光光度法
土壤β木糖苷酶 （SβXYS）比色法檢測試劑盒土壤系列100管/96樣熒光法
化工儀器網(wǎng)