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馬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-04-07 10:29:59瀏覽次數(shù):308

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
英文名稱 Equine Herpesvirus 4 (EHV4)4PCR 規(guī)格 50T
分類 PCR檢測試劑盒 保存條件 -20℃避光保存
馬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:火雞星狀病毒PCR檢測試劑盒Turkey Astrovirus(TAstV)RTPCR火雞腸炎科研PCR檢測試劑盒Turkey Eeritis Coronavirus (TCoV)PCR火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒Turkey Hemorrhagic Eeritis Virus(TuHEV)PCR差異脲原體PCR檢測試劑盒Ureaplasma

詳細(xì)介紹

服務(wù)流程:

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。

中文名稱

馬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒

英文名稱

Equine Herpesvirus 4 (EHV4)4PCR

產(chǎn)品規(guī)格

50T

保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

儲存條件:

僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。

3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。

5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

1.jpg

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實(shí)驗(yàn)過程:

一,、試劑準(zhǔn)備

二、操作步驟

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞、血液,、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況,;

2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息,、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。

實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。

主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。

主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。

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