詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達差異分析、基因分型,。
主要技術(shù):引物設計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR,。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
中文名稱 | 伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Coxiella burnetii ()PCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
相關產(chǎn)品:
吉氏巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
大巴貝蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
莫氏巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
鮑曼不動桿菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
亨德拉病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
實驗過程:
一,、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 |
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Human carbonic anhydrase,CA ELISA Kit肌原調(diào)節(jié)蛋白3ELISA試劑盒 MYOZ3免費代測試劑
Human peptidoglycan recognition protein L,PGRP-L ELISA Kit肌原纖蛋白2ELISA試劑盒 FBN2免費代測試劑
Human Fetuin A ELISA Kit肌原纖蛋白3ELISA試劑盒 FBN3免費代測試劑
Human placeal protein 13,PP13 ELISA Kit肌長蛋白ELISA試劑盒 SSPN免費代測試劑
Human fetal Fibronectin,fFN ELISA Kit肌脂蛋白ELISA試劑盒 SLN免費代測試劑
Human desmosine,DES ELISA Kit肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶ELISA試劑盒 ATP2A1免費代測試劑
Human Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu) ELISA檢測試劑盒
Human undercarboxylated matrix Gla protein,ucMGP ELISA kit雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)試劑盒elisa
Human Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA Kit
Human MyD88 ELISA Kit雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)檢測試劑盒elisa
human MNDA ELISA Kit雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA檢測試劑盒
Human ai-myelin associated glycoprotein aibody,MAG Ab ELISA Kit雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒
伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒土壤中性木聚糖酶(S-NEX)測試盒/分光光度法50管/24樣
土壤中性木聚糖酶(S-NEX)測試盒/微量法100T/48S
土壤總磷/有機磷/無機磷含量測試盒/分光光度法50管/48樣
土壤總磷/有機磷/無機磷含量測試盒/微量法100T/96S
脫氫抗壞血suan還原酶(DHAR)測試盒/分光光度法50管/48樣