實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；

5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品名稱：谷氨酰胺細胞

英文名稱：GlutaMAX-1

貨號：BJ-01X10037

規(guī)格：100ml

我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無菌絲綢布擦拭干凈,，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）,；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管,，加入8mL預熱培養(yǎng)基,。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯,，裝滿37℃的水,，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）,。輕輕晃動凍存管,，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）,。注意凍存管管口不能沒入水中,，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散,，降低DMSO濃度,，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi),。

4）800rpm離心5min，棄上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),，補加適量的培養(yǎng)基,，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng),。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況,，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代,。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗,。

豬環(huán)氧合-2受體(COX-2R)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 苯佐卡因3-(3,4-二氧苯) 98%氟化鈥(III) 無水,粉末, 99.99% metals basis

豬α1抗胰糜蛋白(α1ACT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 苯佐卡因地布卡因 分析標準品硝鑭 99.9% metals basis

豬周期素D3(CCND3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 卡拉膠地布卡因硫鐿,八水 99.9% REO

豬谷氨脫羧1(GAD1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒卡拉膠2-羥丁鈉 97%3-苯酰烯乙酯 94%

豬絲裂原激活蛋白激激活蛋白激3 (MAPKAPK3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒卡拉膠3--3-氧雜環(huán)丁烷 97%2，3-二巰磺鈉鹽 95%

豬胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒I-卡拉膠鄰苯二酰肼 99%二氧乙酯 97%

豬B活化因子受體(BAFFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  I-卡拉膠1-苯哌 97%溴代炔 99%

豬低密度脂蛋白受體(LDLR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒I-卡拉膠2-吡啶 99%金屬鋰粒 99.9% metals basis

豬突觸素(SYP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒K-卡拉膠吡啶-4- 99%碳化鎢 粉末，99.9% metals basis, <10μm

豬T生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 K-卡拉膠2-吡啶 98%碳化鎢 粉末,，99.9% metals basis, ≤1μm

豬白三烯E4(LTE4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 K-卡拉膠鹽丁卡因 99%鈷 99.99%

豬碳酐IX (CA9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰氨二二乙酯硫化銻 98%硫鈷,，七水 AR，99.5%

豬B分化因子(BCDF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  乙酰氨二二乙酯乙鋯 Zr, 15.0 - 16.0 %硫鈷,，七水 99.99% metals basis

豬內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制因子(VASPIN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰氨二二乙酯錸粉 99.999%化鈷 99.998% metals basis

豬胎兒血紅蛋白(HBF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  環(huán)磷酰錸 99.99%硫鎳,，七水 99.99% metals basis

豬甘氨酰tRNA合成(GARS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  環(huán)磷酰吡啶-2- 98%鎳粉 99.99% metals basis，200目
谷氨酰胺細胞槐凝集素連翹（標準品）Human, Mouse

兔血管內(nèi)皮粘附分子1連翹苷（標準品）Human, Mouse, Rat

花生凝集素連翹酯苷A(標準品)Human

人B生長因子連翹酯苷B（標準品）Human, Mouse

兔血纖蛋白原連翹酯苷E(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠凝聚素蓮心（標準品）Human, Mouse, Rat

小鼠抗透明帶抗體蓮心高鹽Human, Mouse

人B分化因子蓮心高鹽（標準品）Human, Mouse, Rat

兔子D二聚體蓮須（標準品）Human, Mouse, Rat