詳細介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
中文名稱 | 副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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實驗過程:
一,、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR,。
糖合酶3ELISA試劑盒 CHSY3Rat heat shock protein 90, hSP-90 Elisa Kit
糖蛋白M6BELISA試劑盒 GPM6BRat heat shock protein 40, hSP-40 Elisa Kit
糖蛋白M6AELISA試劑盒 GPM6ARat heat shock protein 20, hSP-20 Elisa Kit
糖蛋白ⅤELISA試劑盒 GP5Rat amyloid beta peptide 1-40, Aβ1-40 Elisa Kit
糖蛋白49AELISA試劑盒 Gp49aRat Cyclin-D3 Elisa Kit
糖胺聚糖ELISA試劑盒 GAGRat Cyclin-D2 Elisa Kit
羰基化蛋白ELISA試劑盒 PCRat Cyclin-D1 Elisa Kit
羰基還原酶4ELISA試劑盒 CBR4Rat myelin basic protein, MBP Elisa Kit
羰基還原酶3ELISA試劑盒 CBR3Rat Alpha-fetoprotein, AFP Elisa Kit
羰基還原酶1ELISA試劑盒 CBR1Rat Prostatic Acid Phosphatase, PAP Elisa Kit
羰基還原酶[NADPH] 1ELISA試劑盒 CBR1/CBR/CRNRat Free Prostate Specific Aigen, fPSA Elisa Kit
碳suan酐酶ⅫELISA試劑盒 CA12Rat prostate specific aigen, PSA Elisa Kit
碳suan酐酶ⅥELISA試劑盒 CA6Rat ovarian cancer marker-CA125 Elisa Kit
碳suan酐酶ⅤBELISA試劑盒 CA5BRat mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa Kit
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒支鏈轉(zhuǎn)氨酶2(BCAT2)重組蛋白Recombina Branched Chain Aminotransferase 2, Mitochondrial (BCAT2)
鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白Recombina Sphingosine Kinase 2 (SPHK2)
睪蛋白(TEST1)重組蛋白Recombina Testisin (TEST1)
胸腺特異性絲氨suan(TSSP)重組蛋白Recombina Thymus Specific Serine Protease (TSSP)
果糖-1?