產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
本試劑盒是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中caspase 8酶活性或純化的caspase 8酶活性的試劑盒,。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)時(shí),除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測(cè)20個(gè)樣品,。 Caspase是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也稱FLICE,、MACH或Mch5,,有時(shí)被寫作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,,在細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中被激活,。Caspase 8被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中比較上游的一個(gè)caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過(guò)程中caspase 8被激活,,形成一個(gè)由p18和p10組成的二聚體,,進(jìn)一步激活下游的caspase 4,caspase 6,,caspase 9和caspase 10,。 |
本Caspase 8活性檢測(cè)試劑盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)檢測(cè)Caspase 8的活性,。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收,。
試劑盒中提供了caspase 8催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 8酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品,。
試劑盒組分:
裂解液——————8ml
檢測(cè)緩沖液——————8ml
Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
儲(chǔ)存條件:-20℃,。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)elisa試劑盒英文名稱:NRG2 ELISA Kit腺苷酸激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)elisa試劑盒英文名稱:NRG1 ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體包裝250mg
神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)elisa試劑盒英文名稱:NSE ELISA Kit磷酸化鈉ATP酶α1多肽抗體包裝1g
神經(jīng)肽Y(NP-Y)elisa試劑盒英文名稱:NP-Y ELISA KitNa+/K+-ATPase α1 鈉ATP酶α1抗體包裝5g
神經(jīng)肽Y(NPY)elisa試劑盒英文名稱:NPY ELISA Kit肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體包裝1g
神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)elisa試劑盒英文名稱:NF-L ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體包裝250mg
神經(jīng)絲蛋白(NF)elisa試劑盒英文名稱:NF ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體包裝1g
神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)elisa試劑盒英文名稱:proNGF ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)包裝1g
神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)elisa試劑盒英文名稱:NGF ELISA Kit載脂蛋白E抗體包裝250mg
神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)elisa試劑盒英文名稱:GFAP ELISA Kit胎蛋白AFP抗體包裝5g
少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)elisa試劑盒英文名稱:OMgp-Ab ELISA Kit陰離子交換蛋白2抗體包裝100g
上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒英文名稱:ENA-78/CXCL5 ELISA Kit鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝25g
山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒英文名稱:SDH ELISA Kit三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體包裝5g
沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)elisa試劑盒英文名稱:CT IgG ELISA Kit載脂蛋白J抗體包裝10g
色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒英文名稱:PEDF ELISA Kit載脂蛋白H抗體包裝2g
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體糖化血紅蛋白(HbA1C)AT7519 HCl is a multi-CDK inhibitor for CDK1, 2, 4, 6 and 9 with IC50 of 10-210
Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒植物凝膠
其他 冷結(jié)樹(shù)酯,;結(jié)冷膠;吡喃葡萄糖醛酸與6-脫氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物鈣鉀鈉鹽
英文名稱: Phytagel
其他英文名稱: Agar substitute gelling agent,;Gellan Gum
產(chǎn)品規(guī)格: 植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
包 裝: 100克/500克
CAS號(hào):71010-52-1
級(jí)別:Plant cell culture tested
Congealing Temperature:27~32℃
Transmittance:≥80 %
性狀:粉末,,溶于水,溶解度:10mg/ml,。植物組織培養(yǎng)基中工作濃度為1.5-2.5 g/L,,微生物培養(yǎng)基中工作濃度為10 g/L。植物凝膠需要陽(yáng)離子(特別是二價(jià)陽(yáng)離子)存在才能使膠凝固,。一般植物培養(yǎng)基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓phytagel凝固,。微生物學(xué)研究所用的低鹽培養(yǎng)基中為了使Phytagel凝固,通常需要另外加入鈣鹽,、鎂鹽或高濃度的Phytagel
用途:生化研究,。膠凝劑。Phytagel是從假單胞菌分泌而來(lái)的一種瓊脂的替代物,,是葡萄糖醛酸,、鼠李糖和葡萄糖的混合物,具有無(wú)色,、透亮和高韌性的特點(diǎn),,是配制植物組織培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基的主要成分,。由于其克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷為植物學(xué)研究帶來(lái)了一場(chǎng)新的革命,,已經(jīng)成為了的植物組培產(chǎn)品。
保存:RT
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。