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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
20T/100T | 1～3天 |
商品介紹：
工作原理： 在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成,。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,，時(shí)間也很短暫,。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,，并產(chǎn)生 與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,，DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點(diǎn)部位,，可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3),。Cy3 在 554nm 激化,，在 568-574nm 發(fā)射熒光，呈鮮紅色,，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞,。 |
保存條件：-20℃冰凍保存一年。
試劑盒內(nèi)容：
1．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml
2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3．DIG-dUTP(×20)20μl
4．封閉液(Blocking Reagent)4ml
5．生物素化抗抗體(× 100)20μl
6．SABC-CY3(× 100)20μl
7．Proteinase K(×200)50μl
8 抗體稀釋液 4ml
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無菌絲綢布擦拭干凈,，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）,；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
叉頭框蛋白O3(FOXO3)elisa試劑盒英文名稱：FOXO3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體包裝1g
叉頭框蛋白M1(FOXM1)elisa試劑盒英文名稱：FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體包裝5g
叉頭框蛋白A2(FOXA2)elisa試劑盒英文名稱：FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體包裝1g
層粘連蛋白β1(LAMβ1)elisa試劑盒英文名稱：LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體包裝250mg
層粘連蛋白α1(LAMα1)elisa試劑盒英文名稱：LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g
補(bǔ)體因子D(CFD)elisa試劑盒英文名稱：CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g
補(bǔ)體因子B(CFB)elisa試劑盒英文名稱：CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)elisa試劑盒英文名稱：C5aR1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體包裝25g
補(bǔ)體成分5a(C5a)elisa試劑盒英文名稱：C5a ELISA Kit碳化合物激結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5(C5)elisa試劑盒英文名稱：C5 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4b(C4b)elisa試劑盒英文名稱：C4b ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g
補(bǔ)體成分4a(C4a)elisa試劑盒英文名稱：C4a ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4(C4)elisa試劑盒英文名稱：C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分3(C3)elisa試劑盒英文名稱：C3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝1g
補(bǔ)體3a(C3a)elisa試劑盒英文名稱：C3a ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝25g
鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine
沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G,；so
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)乙二胺四乙二鉀鹽
其他 乙二胺四乙鉀,； EDTA二鉀鹽二水合物
英文名稱： EDTA-2K
其他英文名稱： Ethylenediaminetetraacetic acid dipotassium salt dihydrate；EDTA dipotassium salt dihydrate
產(chǎn)品規(guī)格： 超純,，99%
包裝：100克/500克
CAS號(hào)：25102-12-9
C10H14N2O8K2•2H2O=404.45
級(jí)別：Ultra pure grade
含量：≥99.0%
pH（50g/L,，25℃）：4.0～5.0
澄清度試驗(yàn)：合格
硫鹽：≤0.01%
氯化物：≤0.002%
重金屬：≤0.001%
鐵：≤0.001%
性狀：結(jié)晶性粉末。易溶于水,，不溶于乙,。熔點(diǎn) 272℃(分解),。25℃時(shí)5%的水溶液pH 4～5
用途：生化研究。絡(luò)合劑,。食品抗氧劑,。醫(yī)藥助劑
保存：RT
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
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