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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-20 11:41:48瀏覽次數(shù)：299
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | FS-X9659 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit | 100T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒各組分均以無(wú)菌形式提供，可直接用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),。臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue）,，一種偶氮,、親水性酸性藍(lán)色染料,，可透過(guò)死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色,，而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性，可將臺(tái)盼藍(lán)排斥在外,，因此,，通過(guò)顏色的變化即可將活細(xì)胞（活細(xì)胞呈透明無(wú)色）和死細(xì)胞鑒別開來(lái)，基于此原理,，本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評(píng)估,。臺(tái)盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺(tái)盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光,。另外,，臺(tái)盼藍(lán)（合適濃度）還常用來(lái)淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號(hào)。 |
使用方法
1）對(duì)于懸浮細(xì)胞,，離心收集細(xì)胞,，對(duì)其充分清洗后，加入適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,；對(duì)于貼壁細(xì)胞,，先用胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液,。
2）取0.1ml單細(xì)胞懸液,，按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色3~10min,。
【注】：因臺(tái)盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性,，染色時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色，干擾計(jì)數(shù),。通常染色3min即可,。
3）取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)，于顯微鏡低倍鏡下計(jì)數(shù),，分別計(jì)算著色細(xì)胞（即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和總細(xì)胞,。
【注1】：用移液槍加染色細(xì)胞時(shí)，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個(gè)小室,。不可過(guò)量加液或者不足量,。
【注2】：1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通常控制在20-50 cells,，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過(guò)200個(gè),，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來(lái)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比,，
a,，計(jì)算每ml細(xì)胞數(shù)目：Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104,；【注】：此時(shí)的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細(xì)胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c,，細(xì)胞活力值：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)×100
【注】：通常情況,，健康的對(duì)數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到95%,。
儲(chǔ)存條件：室溫,，有效期2年
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,，不要用紗布,；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)elisa試劑盒英文名稱：MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體包裝25g
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)elisa試劑盒英文名稱：MCP1 ELISA Kit周期B3抗體包裝1g
單氧化A(MAOA)elisa試劑盒英文名稱：MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗體包裝25g
存活(Surv)elisa試劑盒英文名稱：Surv ELISA Kit上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7包裝5g
簇集蛋白(CLU)elisa試劑盒英文名稱：CLU ELISA Kit周期D結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
促胰液(SCT)elisa試劑盒英文名稱：SCT ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體包裝5g
促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa試劑盒英文名稱：TPPP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體包裝1g
促泌(SCGN)elisa試劑盒英文名稱：SCGN ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體包裝25g
刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)elisa試劑盒英文名稱：HHIP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體包裝5g
次磷核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)elisa試劑盒英文名稱：HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝5mg
雌激受體β(ERβ)elisa試劑盒英文名稱：ERβ ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體包裝100g
雌激受體α(ERα)elisa試劑盒英文名稱：ERα ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體包裝25g
垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)elisa試劑盒英文名稱：ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體包裝25g
穿孔1(PRF1)elisa試劑盒英文名稱：PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(FGFR3)elisa試劑盒英文名稱：FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體包裝25g
光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers. 質(zhì)量規(guī)格：含量>98.5%，類白色粉末游離三狀腺原試劑盒鹽白屈菜紅堿;Chelerythrin
嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31游離肉堿elisa試劑盒銀杏酚;Ginkgolic acids
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離前列腺特異性抗原試劑盒野菊花內(nèi)酯;Yejunualactone
臺(tái)盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒乙二胺四乙二鈉鎂鹽
其他 EDTA二鈉鎂,；乙二胺四乙鎂二鈉鹽,； (OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)甘合]](4-)-N,N’,O,O’,O,N,O,N’-鎂(2-)二鈉鹽；EDTA鎂鈉鹽
英文名稱： EDTA-MgNa2
其他英文名稱： Ethylenediaminetetraacetic acid disodium magnesium salt,；EDTA magnesium disodium,；Magnesium sodium ethylenediaminetetraacetate
產(chǎn)品規(guī)格： CP，98.5%
包裝：100克
CAS號(hào)：14402-88-1
C10H12N2Na2MgO8=358.50
級(jí)別：CP
含量：98.5～101.0%
澄清度試驗(yàn)：合格
鐵：≤0.002%
重金屬：≤0.001%
性狀：結(jié)晶性粉末,。易潮解,。溶于水和
用途：生化研究。絡(luò)合劑,，測(cè)定鋼鐵中鎳,、絡(luò)、錳離子(用于取代滴定),。
保存：RT
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
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