詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)
英文名稱:Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-8 檢測(cè),。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,,其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂,、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān),。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性,;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,,活化的Caspase-8 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成,,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,。Caspase-8 熒光檢測(cè)試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán),。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來,,可通過熒光酶標(biāo)儀測(cè)定其熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm),。 |
注意事項(xiàng)
1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用,。
2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機(jī)制,這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測(cè)Caspase-8 活性無明顯改變,,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路,。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測(cè)定需要的100~200μg 蛋白的要求,,因?yàn)镃aspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),,如測(cè)定的RFU 值偏低,可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時(shí)間,,如果值還是不高,,可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)elisa試劑盒英文名稱:FGF4 ELISA Kit艾滋病病制約錨定蛋白抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)elisa試劑盒英文名稱:FGF-13 ELISA Kit腺苷環(huán)化酶1抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)elisa試劑盒英文名稱:FGF10 ELISA Kit核糖核酶L抑制蛋白抗體包裝5g
超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒英文名稱:SOD ELISA KitRho GTP酶激活蛋白24抗體包裝25g
超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa試劑盒英文名稱:hs-CRP ELISA KitGTP酶激活蛋白ASAP3抗體包裝5g
腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒英文名稱:iFABP ELISA Kit激活素受體1C抗體包裝25g
叉頭框蛋白03(FoxP3)elisa試劑盒英文名稱:FoxP3 ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶13型抗體包裝1g
層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒英文名稱:LN ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶11抗體包裝25g
草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)elisa試劑盒英文名稱:PAT ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶12抗體包裝5g
不對(duì)稱二基精(ADMA)elisa試劑盒英文名稱:ADMA ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶15抗體包裝1g
補(bǔ)體因子H(CFH)elisa試劑盒英文名稱:CFH ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶2抗體包裝25g
補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒英文名稱:C5a ELISA Kit載脂蛋白E2受體抗體包裝5g
補(bǔ)體片斷3a(C3a)elisa試劑盒英文名稱:C3a ELISA Kit腺苷A1受體抗體包裝100g
補(bǔ)體蛋白5(C5)elisa試劑盒英文名稱:C5 ELISA Kit通道蛋白0抗體包裝1g
補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體包裝25g
淀粉樣肽前體蛋白抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Isoindigotin is used in the therapy of Y.
Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)玉米烯酮
其他玉米赤霉烯酮,;赤霉烯酮
英文名稱:Zearalenone
其他英文名稱:[S-(E)]-3,4,5,6,9,10-Hexahydro-14,16-dihydroxy-3-methyl-1H-2-benzoxacyclotetradecin-1,7(8H)-dione
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包 裝: 10毫克/25毫克
CAS號(hào):17924-92-4
C18H22O5=318.36
級(jí)別:BR
含量:≥98%
干燥失重:5~8.5%
重金屬:≤20ppm
性狀:淺黃色粉末,,well soluble in dilute solutions of alkali hydroxides or carbonates用途:生化研究,。