詳細介紹
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Caspase-8 Colorimetric Assay Kit | 20T|50T|100T | 1~3天 |
商品介紹:
本試劑盒適用于培養(yǎng)細胞及新鮮組織caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,。在CD95 凋亡途徑中, Caspase-8 作為最上游的級聯(lián)酶,,可被TNF 激活。受細胞表面受體(如Fas)的激活,,Caspase-8 能引起下游級聯(lián)酶的活性,如Caspase-3,。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性,;但在細胞發(fā)生凋亡階段,它可被激活,。Caspase-8 分光光度法檢測試劑盒就是將caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團,當(dāng)該底物被caspase-8 剪切后,,發(fā)色基團即游離出來,可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(λ=405nm 或400nm)測定其吸光值,,可考察caspase-8 的活化程度。 |
注意事項
1. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機制,,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路,。
2. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用,。
3. 細胞數(shù)量需達到3~5×106 個或新鮮組織100mg,以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,,因為Caspase-8 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測定的OD 值偏低,,可通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
促狀腺激素(TSH)elisa試劑盒英文名稱:TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化酶10抗體包裝5g
促黃體激素(LH)elisa試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit腺苷環(huán)化酶5抗體包裝25g
促紅細胞生成素(EPO)elisa試劑盒英文名稱:EPO ELISA Kit腺苷環(huán)化酶6抗體包裝5g
雌三(E3)elisa試劑盒英文名稱:E3 ELISA Kit腺苷環(huán)化酶9抗體包裝5g
雌激素硫轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)elisa試劑盒英文名稱:SULT1E1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號染色體)抗體包裝1g
雌激素(E)elisa試劑盒英文名稱:E ELISA Kit三磷腺檸檬裂解酶抗體包裝5g
雌二受體(ER)elisa試劑盒英文名稱:ER ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體包裝25g
雌二(E2)elisa試劑盒英文名稱:E2 ELISA Kit內(nèi)收蛋白a1抗體包裝5g
垂體腺苷環(huán)化酶激活肽(PACAP)elisa試劑盒英文名稱:PACAP ELISA Kitα2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體包裝100ml
垂草扁桃(VMA)elisa試劑盒英文名稱:VMA ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝25ml
穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa試劑盒英文名稱:PF/PFP ELISA Kit早老素γ分泌酶抗體包裝5ml
程序性死亡1(PD-1)elisa試劑盒英文名稱:PD-1 ELISA Kit鈉ATP酶蛋白a1抗體包裝100ml
成纖維細胞生長因子9(FGF9)elisa試劑盒英文名稱:FGF9 ELISA KitRho鳥苷交換因子2抗體包裝25ml
成纖維細胞生長因子8(FGF8)elisa試劑盒英文名稱:FGF8 ELISA Kit磷化Rho鳥苷交換因子2抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子6(FGF6)elisa試劑盒英文名稱:FGF6 ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶9抗體包裝25g
載脂蛋白E抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Clemizole is a H1 histamine receptor antagonist.Recently, researchers have ident
Caspase 8分光光度法檢測試劑盒原三乙酯
其他 1,,1,,1-三乙氧基烷;原乙酯,;三乙氧基烷;鄰酯,;三乙基
英文名稱: Triethyl orthopropionate
其他英文名稱: Orthopropionic acid triethyl ester,;1,1,1-Triethoxypropane
產(chǎn)品規(guī)格: AR,,97%
包 裝: 25毫升/100毫升/500毫升
CAS號:115-80-0
C9H20O3=176.25
級別:AR
含量:≥97.0%(GC)
折光率:1.4010~1.4040
比重:0.8850~0.8910
性狀:無色透明液體,。水中分解。沸點:158℃,,閃點:60℃
用途:生化研究。用于有機合成,、染料工業(yè)、制藥工業(yè)和膠片增感劑,。
保存:RT
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。