詳細介紹
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
DiOC18(3) | 10mg | 1~3天 |
商品介紹:
本探針是常用的細胞膜熒光探針之一,,呈現(xiàn)綠色熒光,。DiO是一種親脂性膜染料,,進入細胞膜后可以側向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色,。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱,,僅當進入到細胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光,。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,,DiO和磷酯雙層膜結合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖,。其中,大激發(fā)波長為484nm,,大發(fā)射波長為501nm,。 |
CAS:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.72
DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF,,溶解度約為1-2.5mg/ml,。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解,。
DiO被廣泛用于正向或逆向的,,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會明顯影響細胞的生存力(viability),。DiO對于細胞膜染色的熒光強度通常要低于DiI,,有時對于某些經過固定的組織的染色效果欠佳。
DiO除了簡單的細胞膜熒光標記外,,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,,檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等,。
用于細胞膜熒光標記時,,DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM,。DiO可以直接染色活的細胞或組織,,染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織,,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進行固定,,使用其它不適當?shù)墓潭ㄒ簳е聼晒獗尘拜^高。
注意事項:熒光染料均存在淬滅問題,,請盡量注意避光,,以減緩熒光淬滅。
儲存條件:4℃避光,,有效期一年,。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。
無磷二氫鈉(標準品)英文名稱: Ambrisentan磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝5g
無磷氫二鈉(標準品)英文名稱: Ambrisentan磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝1g
無味霉A晶型(標準品)英文名稱: Dronedarone HCL膀胱癌缺失基因1包裝1g
無味霉B晶型(標準品)英文名稱: Dronedarone磷化膀胱癌缺失基因1抗體包裝1g
西吡銨(標準品)英文名稱: Ranolazine HCl多巴受體D4抗體包裝5g
西洛多辛(標準品)英文名稱: Ranolazine HCl橋粒斑蛋白1抗體包裝1g
西米替汀(標準品)英文名稱: Lercanidipine HCl橋粒斑蛋白2抗體包裝250mg
西尼地平(標準品)英文名稱: Lercanidipine HCl多巴受體D5抗體包裝5g
西沙必利(標準品)英文名稱: Promethazine Hydrochloride脫氧尿嘧啶三磷核苷解抗體包裝1g
西替利雜質A(1-[(4-)基]哌)(標準...英文名稱: Agomelatine多巴受體D3抗體包裝5g
昔萘沙美特羅(標準品)英文名稱: Agomelatine誘捕受體3抗體包裝1g
烯酰嗎啉(標準品)英文名稱: Piracetam多巴轉運蛋白DAT抗體包裝1g
腺嘌呤(標準品)英文名稱: Ramelteon誘捕受體2抗體包裝5g
腺嘌呤核苷(腺苷)(標準品)英文名稱: Lacosamide腫瘤調亡/死亡受體5抗體包裝1g
腺嘌呤鹽鹽(標準品)英文名稱: Milnacipran 核心蛋白聚糖抗體包裝5g
酵母菌Saccharomyces│sp. 質量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)微管相關蛋白2試劑盒三白草;sauchinone
凍土毛霉Mucor│hiemalis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B試劑盒2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾
青霉屬Penicillium│sp. 質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng)微管相關蛋白1A/1B輕鏈3A試劑盒尚含雞納甙;Quinovin
細胞膜綠色熒光探針(DiO)溴化金
其他 三溴化金
英文名稱: Gold tribromide
其他英文名稱: Gold(III)bromide,; Auric bromide
產品規(guī)格: BR,,99%
包裝:1克/5克
CAS號:10294-28-7
AuBr3=436.68
級別:BR
含量:≥99.0%
性狀:棕黑色粉末。對光敏感,。有吸濕性,。溶于水成紅棕色溶液,溶于乙和甘油,但逐漸被還原成金屬。熔點約160℃(分解),。有腐蝕性,。
用途:生化研究。測定有機堿和某些生物堿
保存:RT,,避光
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。