培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HAA抑制劑(MKC9989) | MKC9989 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
MKC9989是一種HAA抑制劑,且能抑制IRE1α其IC50值在0.23μM至44μM的范圍之間,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1338934-20-5 純度:98.01% 分子量:336.34 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
豚鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒B淋巴淋巴瘤因子9抗體人鈣調(diào)(CAM)ELISA試劑盒 王不留行黃苷
豚鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒膽綠還原抗體人鈣調(diào)(CAM)ELISA試劑盒 維生A
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒BIVM蛋白抗體人真胰島(TI)ELISA試劑盒 維生A醋酯
豚鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒血型Lewis A抗原抗體人真胰島(TI)ELISA試劑盒 維生A
HAA抑制劑(MKC9989)5′-腺苷一磷
其他5′-腺苷,;腺苷-5′-單磷;腺苷-5′-磷,;5′-磷腺苷,;5'-腺嘌呤核苷,;5'-腺嘌呤核甙,;5-單磷腺苷
英文名稱:5′-AMP
其他英文名稱:Adenosine-5′-Monpohosphate;5'-Adenylic acid,;Adenosine-5'-monophosphoric acid
產(chǎn)品規(guī)格:高純,,95%
包 裝: 1克/5克/25克/100克
CAS號:61-19-8
C10H14N5O7P=347.22
級別:High purity grade
含量:≥95.0%(HPLC)
A250/A260:0.79~0.90
A280/A260:0.18~0.22
Em (258nm, Phosphate Buffer, pH 7.0):>11000
重金屬:≤0.002%
性狀:結(jié)晶粉末
用途:生化研究
保存:2~8℃