CDK4/FLT3雙重抑制劑（AMG 925）正在出售的產(chǎn)品：大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1Elisa
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豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3

中文名稱：CDK4/FLT3雙重抑制劑（AMG 925）

注意事項：

1,、本試劑盒僅供科學研究使用,，不可用于診斷或治療。

2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失,。

3,、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果,。

4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7,、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收,，從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大,，則需要除去培養(yǎng)基,，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。

9,、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。

11,、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。

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CDK4/FLT3雙重抑制劑（AMG 925）N-乙酰-D-亮

其他N-乙酰-D-白,；N-乙酰基-D-亮

英文名稱：N-Acetyle-D-Leucine

其他英文名稱：2-(Acetylamino)-4-methylpentanoic acid

產(chǎn)品規(guī)格：BR,，99%

包裝：5克/25克/100克

CAS號：19764-30-8

C8H15NO3=173.21

級別：BR

含量：≥99.0%

性狀：至類結(jié)晶粉末,。

用途：生化研究。

保存：-20℃

操作規(guī)程：

1,、在96孔板加入細胞00μL/孔,，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00

b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)