詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:RSK抑制劑(LJH685)
英文名稱:LJH685 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 LJH685是一種有效的選擇性RSK抑制劑,抑制RSK1/2/3生物活性,IC50為4到13nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1627710-50-2 分子量:381.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時(shí)試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
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RSK抑制劑(LJH685)安息香
其他 偶姻,;甲酰甲,;基-α-羥基甲基甲,;α-羥基-α-基乙;2-羥基-2-基乙,;2-羥基-1,2-二基乙,;二乙;安息香,;二二氧代乙
英文名稱: Benzoin
其他英文名稱: Phenyl-α-hydroxybenzyl ketone,;α-Hydroxy-α-phenylacetophenone;2-Hydroxy-2-phenylacetophenone,;2-Hydroxy-1,2-diphenylethanone,;Phenyl benzoyl carbinol
產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):119-53-9
C14H12O2=212.25
級(jí)別:CP
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):133~137℃
靈敏度試驗(yàn):合格
灼燒殘?jiān)?/span>(以硫鹽計(jì)):≤0.1%
性狀:或淡黃色結(jié)晶或粉末,。能還原費(fèi)林氏溶液,。溶于吡啶、沸乙和,。溶于3335份冷水,稍多溶于熱水,。相對(duì)密度(d204) 1.310。沸點(diǎn)334℃(102.39kPA),。閃點(diǎn)181℃,。大吸收波長(乙中) 247nm(ε 14500)。
用途:生化研究,。熒光反應(yīng)檢驗(yàn)鋅,。測(cè)熱法的標(biāo)準(zhǔn)。防腐劑,。有機(jī)合成
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