PKH67/PI雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒公司*的商品：細(xì)菌RNA提取試劑小駁骨（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
RNAin（非凍型RNA樣品保存液）小檗紅（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse
總RNA提取試劑小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
液體樣品RNA提取試劑小檗皮（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse
RNA高效保存液小豆蔻明(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì),，可以用來檢測化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用,。

熒光染料PKH67是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,，可以標(biāo)記活體細(xì)胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞,。對細(xì)胞毒性較小,，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜,，有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光,。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能,。

在細(xì)胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減,，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖,，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,，PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,，通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞,，分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度)，二次(1/4的熒光強(qiáng)度),，三次(1/8的熒光強(qiáng)度),，以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞,。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。

除了用于細(xì)胞增殖檢測,，PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,，陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上,，標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,，能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況,；或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi)，可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化,。

PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn),。PKH67 毒性較小,，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單,，且不用放射性同位素,，不存在安全隱患,?？梢愿焖?，更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),。

PKH67/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測,。

PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm,。流式檢測時(shí)的激發(fā)波長可以選擇488nm,，此時(shí)的發(fā)射波長為502nm,，使用流式細(xì)胞儀檢測時(shí)可以采用FL1 detection channel,。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光，流式檢測時(shí)的激發(fā)波長可以選擇488nm,，此時(shí)的發(fā)射波長為647nm,，使用流式細(xì)胞儀檢測時(shí)可以采用FL2 detection channel,。

PKH67標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞毒性外，還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測,，或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察,。

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存,。
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布,；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）,；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。

Pregnenolone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 6-TG/ThioguanineCD9蛋白抗體包裝100g

Progesterone（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-TG/ThioguanineCD23/FcεRII抗體包裝25g

Promestriene(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD27抗體包裝500g

RNH-奧美沙坦酯雜質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD30抗體包裝25g

Rosiglitazone HCL (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： BicalutamideCD43抗體包裝5g

Rosiglitazone Maleate（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BicalutamideCD48抗體包裝1g

Rosiglitazone（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Busulfan/MyleranCD44抗體包裝5g

Sitagliptin phosphate monoh...英文名稱： Busulfan/Myleran整合αX抗體包裝100g

Sivelestat sodium (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Lomustine表面趨化因子受體5抗體包裝25g

Sorafenib tosylate（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： LomustineCD2抗體包裝25g

Stanozolol（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hydroxyurea/HydroxycarbamideC-肽抗體包裝5g

Tamoxifen Citrate （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hydroxyurea/Hydroxycarbamide鈣結(jié)合蛋白抗體包裝1g

Tetrabenazine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白抗體包裝5g

Toremifene Citrate（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白單克隆抗體包裝100g

Triamcinolone Acetonide(標(biāo)準(zhǔn)品...英文名稱： Toremifene Citrate環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體包裝25g

產(chǎn)黑假交替單胞菌Pseudoalteromonas│nigrifaciens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管抑/血管穩(wěn)定蛋白試劑盒血竭;Cochinchinenin

: =ATCC35674資源名稱: 自養(yǎng)黃色桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,5-HT2A高效選擇性激動(dòng)劑血管性血友病因子裂解試劑盒西貝母堿苷;Sipeimine-3β-D

耐熱克魯維酵母Kluyveromyces│thermotolerans 質(zhì)量規(guī)格：>99%血管舒緩激肽試劑盒繡球酚 ;Hydrangenol
PKH67/PI雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒氧化釓

其他 三氧化二釓

英文名稱： Gadolinium(III)oxide

其他英文名稱： Gadolinia

產(chǎn)品規(guī)格： 3.5N

包　　裝： 5克/25克/100克/500克

CAS號(hào)：12064-62-9

Gd2O3=362.50

級別：3.5N

含量：≥99.95%

性狀：單斜結(jié)晶或粉末,。有吸濕性,能從空氣中吸收水分及二氧化碳。溶于而形成鹽類,不溶于水,。相對密度(d15)7.407,。熔點(diǎn)2330℃,。有刺激性

用途：生化研究。電子屏蔽,。熒光材料,。催化劑。絕緣陶瓷,。高折射光學(xué)玻璃,。電視磷光激活劑

保存：RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大??；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。