培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Pirarubicin鹽酸鹽是doxorubicin的類似物,是Topo II抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):95343-20-7 別名:THP Hydrochloride 純度:96.90% 分子量:664.1 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
綠色鏈霉菌平足蛋白抗原Anti-DNAJC5 Antibody人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒
鮑姆木層孔菌多囊腎蛋白1抗原Anti-DNAL1 Antibody人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒
根霉多囊腎蛋白2抗體Anti-DNMT3B Antibody人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒
假單胞菌屬磷化蛋白激B抗原(絲磷化位點(diǎn):473)Anti-DNMT3L Antibody人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒
瓦尼針層孔菌Raf激抑制蛋白抗原Anti-DOK1 Antibody人6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒
冷溫木拉克酵母乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)Anti-DOK2 Antibody人6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒
放射形根瘤菌乙肝病pre-X蛋白抗原(C端)Anti-DNPH1 Antibody人心納(ANF)ELISA試劑盒
芬尼青霉脯羥化(多肽)Anti-DOK1 Antibody人心納(ANF)ELISA試劑盒
棒曲霉新型金屬基質(zhì)蛋白(抗原)Anti-DOK3 Antibody人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒
雅致放射毛霉脂聯(lián)受體-1(抗原)Anti-DOK2 Antibody人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌脂聯(lián)受體-2(抗原)Anti-DOK6 Antibody人精加壓(AVP)ELISA試劑盒
枝孢霉前列腺性磷抗原Anti-DOK4 Antibody人精加壓(AVP)ELISA試劑盒
貪噬菌屬前列腺性磷抗原(人)Anti-DOK7 Antibody人垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
卷枝毛霉P選擇抗原Anti-DP-1 Antibody人垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
黃色短桿菌*溶體膜糖蛋白抗原Anti-DPF2 Antibody人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒
解淀粉芽孢桿菌一種腫瘤抑制基因抗原(C端)Anti-DPF2 Antibody人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒
p53誘導(dǎo)蛋白3抗體土星漢遜酵母人肝膽管癌細(xì)胞
組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移CARM1抗體健強(qiáng)地霉人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞
蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移1抗體葡萄芽假絲酵母人肺鱗癌細(xì)胞
孕激受體膜相關(guān)元件抗體間型酒香酵母人舌鱗癌細(xì)胞
Topo II抑制劑(Pirarubicin鹽酸鹽)對硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷
其他4-硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷
英文名稱:PNPG
其他英文名稱:4-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside,;p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):2492-87-7
C12H15NO8=301.25
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:-96~-117°(C=1 in water)
水分:≤10.0%
Free p-nitrophenol:≤0.01%
性狀:淡黃色粉末,,熔點(diǎn)166~169 °C,,溶于甲:100mg/ml
用途:生化研究。α-D-半乳糖苷(α-D-Galactosidase)的底物,。結(jié)合到大腸桿菌乳糖蛋白載體上
保存:?20°C,,保質(zhì)期3年