中文名稱:即用型DAPI染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10ml|50ml
發(fā)貨周期:1~3天
DAPI(4,6-Diamidino-2-phenylindole ,,4,6-二氨基-2-苯基吲哚)是一種DNA 特異性染料,與DNA產(chǎn)生非嵌入式結(jié)合,,發(fā)出藍(lán)色熒光,。該染料對(duì)細(xì)胞膜有半通透性,,可透過正?;罴?xì)胞產(chǎn)生較弱的藍(lán)色熒光(細(xì)胞固定后熒光增強(qiáng)),而凋亡細(xì)胞的膜通透性增加,,對(duì)其攝取能力增強(qiáng),,產(chǎn)生很強(qiáng)藍(lán)光染色。
正常細(xì)胞的核形態(tài)呈圓形,,邊緣清晰,,染色均勻,而凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核邊緣不規(guī)則,,細(xì)胞核染色體濃集,,著色較重,并伴有細(xì)胞核固縮,,核小體碎片增加,,因此從熒光強(qiáng)度及核形態(tài)均可鑒別出細(xì)胞發(fā)生凋亡的典型特征。
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操作方法(本方法針對(duì)貼壁細(xì)胞,,但不僅限于貼壁細(xì)胞)
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞爬片棄去培養(yǎng)基,,10mM PBS,pH7.4,,洗一次,;
2. 再滴加入100μL 的DAPI 染液,室溫避光染色5-15 min,;
3. 棄去染色液,,PBS 漂洗一次,
4. 滴加甘油或Buffer A,,熒光顯微鏡以340/380nm 紫外光激發(fā),,500×(40×12.5)(好是100×油鏡頭)觀察、拍照,。
儲(chǔ)存:2-8℃,,避光,有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時(shí)試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
丹酚F英文名稱: CDA, 1,1-Cyclohexanediacetic acidFAM59B蛋白抗體包裝5g
丹皮酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cellulose acetateFAM59A蛋白抗體包裝1g
丹皮酚新苷英文名稱: Cerium(III) acetate hydrateFAM160B1蛋白抗體包裝100g
丹皮酚原苷;牡丹酚原甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cerium(IV) sulfate tetrahydrateFAM161B蛋白抗體包裝25g
丹葉大黃英文名稱: Cesium carbonateFAM151A蛋白抗體包裝1g
丹葉大黃-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: Chicago sky blue 6B跨膜蛋白29抗體包裝25g
丹芝B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chloramine T, trihydrateFAM154A蛋白抗體包裝5g
單白前苷B英文名稱: Chlorazol black EFAM155A蛋白抗體包裝1g
膽固(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chloroauric acid, hydrateFAM164B蛋白抗體包裝5g
膽紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholesteryl acetateFRMD3蛋白抗體包裝1g
膽木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholesteryl stearateFRMD4B蛋白抗體包裝25g
膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Choline bitartrateFRMD7蛋白抗體包裝5g
淡豆豉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chromium granularFRMD4A蛋白抗體包裝1g
蛋黃磷脂酰膽堿英文名稱: Chromium powder延胡索酰乙酰乙解抗體包裝1g
當(dāng)歸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chromium(III) chloride, hexahydrateFAM101A蛋白抗體包裝25g
涅斯特連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR神經(jīng)絲蛋白M試劑盒七葉膽苷XVII ;Gypenoside
嗜鞣管囊酵母Pachysolen│tannophilus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)絲蛋白L試劑盒青霉; Penicillinase
: HBUM74223資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%神經(jīng)絲蛋白H試劑盒七葉皂苷A;Aescin IA
即用型DAPI染色液五氧化二鉭
其他 鉭酐,;氧化鉭(V),;五氧化鉭;五氧化二鉭(V)
英文名稱: Tantalum(V) oxide
其他英文名稱: Tantalum pentoxide,;Tantalic acid anhydride,;Tantalum oxide
產(chǎn)品規(guī)格: 4N
包 裝: 25克/100克
CAS號(hào):1314-61-0
Ta2O5=441.89
級(jí)別:4N
含量:≥99.99%
A1:≤3ppm
Mo:≤2ppm
As:≤1ppm
Na:≤5ppm
性狀:微晶或粉末。能被熔融的硫氫鉀或苛性鉀 所分解,,并與后者生成鉭鉀,。溶于氫氟,不溶于水,、乙和礦,。相對(duì)密度 7.6。熔點(diǎn) 1800℃,。半數(shù)致死量(大鼠,,經(jīng)口)8000mg/kg
用途:生化研究。光學(xué)玻璃,、金屬鉭和碳化鉭,。
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)