培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Indole-3-carbinol是芳烴受體(AhR)的激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):700-06-1 別名:3-Indolemethanol 純度:98.0% 分子量:147.17 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
綠針假單胞菌綠針亞種Sporobolomyces bannaensis
串珠鐮孢Sporobolomyces bannaensis
盤長(zhǎng)孢狀盤孢Sporobolomyces bannaensis
5#---2號(hào)(梨形灰包)Lipomyces starkeyi
哈茨木霉Candida krusei
短小芽孢桿菌Candida rugopelliculosa
類芽孢桿菌屬Saccharomyces exiguus
金黃殼囊孢菌Candida kefyr
釀酒酵母Candida tropicalis
蒼白鹽八疊球菌Sporobolomyces bannaensis
褐孢大禿馬勃Sporobolomyces sp.
乳桿菌屬Saccharomyces cerevisiae
甘家湖擬諾卡氏菌Sporobolomyces odoratus
棲土曲霉Candida pseudointermedia
聚多曲霉Hanseniaspora uvarum
李色鏈霉菌Pichia kluyveri
小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒性神經(jīng)鞘磷脂抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 毛蕊異黃苷
小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 茅蒼術(shù)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 沒食子兒茶
小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 沒食子兒茶沒食子酯
AhR激動(dòng)劑(Indole-3-carbinol)BOC-L-天門冬β-芐酯
其他叔丁氧羰基-天冬β芐脂,;N-(羰基叔丁基醚)-L-天冬4-甲酯,;Boc-L-天冬4-芐酯;N-叔丁氧羰基-L-天冬4-芐酯,;L-天冬β芐脂,;N-BOC-L-天冬-4-芐酯
英文名稱:Boc-L-aspartic acid 4-benzyl ester
其他英文名稱:N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-aspartic acid 4-benzyl ester
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克
CAS號(hào):7536-58-5
C16H21NO6=323.34
級(jí)別:BR
含量:≥99%
比旋光度:-18±2o(c =2 in DMF)
性狀:至類粉末,,熔點(diǎn)98~106℃
用途:生化研究,。
保存:RT