詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
3×10ml|3×20ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途:
專門用于血液或骨髓細胞涂片的中性粒細胞的堿性磷酸酶染色,,又稱同時偶聯(lián)法。
注意事項:
堿性磷酸酶活性部位呈藍色,,位于胞槳中,。油鏡下計數(shù)101個中性粒細胞,求出百分比和積分,。非特異性反應少,,結果可靠。
儲存條件:4℃,,避光,,6個月
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
蓮心堿高鹽(標準品)英文名稱: 3,4-DihydroxybenzaldehydeLRIG1抗體包裝25mg
蓮須(標準品)英文名稱: 3,4-DihydroxybenzaldehydeLRIG3抗體包裝5mg
蓮子(標準品)英文名稱: Thiamphenicol glycinate HCl肝腸鈣粘連蛋白抗體包裝10g
蓮子心(標準品)英文名稱: Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate透明質受體抗體包裝50g
兩面針(標準品)英文名稱: Enduracidin17號染色體開放閱讀框82抗體包裝10MG
亮菌(標準品)英文名稱: (+)-Catechin hydrate轉錄因子LMCD1抗體包裝100mg
遼東楤木皂苷X(標準品)英文名稱: (+)-Catechin hydrate淋巴抗原76抗體包裝500mg
了哥王(標準品)英文名稱: (+)-Catechin富含亮重復序列LRP15抗體包裝1g
烈香杜鵑(標準品)英文名稱: Vitamin B6 Hydrochloride富含亮重復跨膜神經(jīng)元蛋白1抗體包裝250mg
烈香杜鵑油(標準品)英文名稱: vitamin B6層粘蛋白α2抗體包裝1g
林生續(xù)斷苷I英文名稱: Fidaxomicin內(nèi)皮脂肪抗體包裝250mg
林澤蘭內(nèi)酯B(標準品)英文名稱: (+)-Bicuculline可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體包裝250mg
林澤蘭內(nèi)酯C(標準品)英文名稱: (+)-Bicuculline層粘連蛋白β2抗體包裝100g
林澤蘭內(nèi)酯D(標準品)英文名稱: (?)-Huperzine A白衍生化學吸引抗體包裝500g
靈仙新苷英文名稱: EGC T淋巴易位蛋白2抗體包裝1g
蟬花1-10Isaria│cicadae Miq. 質量規(guī)格:>98%,BR抗磷脂酰乙抗體試劑盒二氫;Hydrocoumarin
栓孔菌Trametes│sp. 質量規(guī)格:≥90%;for fluorescence抗磷脂酰乙抗體試劑盒5,7-二羥基色原;5,7-dihyd
: J1資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質量規(guī)格:用于熒光標記抗磷脂酰乙抗體試劑盒N,N’-二基蝙蝠葛堿化物 ;N,N
中性粒細胞堿性磷酸酶染色液(NAP)順丁烯二鈉
其他 馬來鈉,;(Z)-2-丁烯二單鈉鹽;失水蘋果氫鈉,;順丁烯氫鈉
英文名稱: Maleic acid sodium salt
其他英文名稱: cis-Butenedioic acid sodium salt,;Toxilic acid sodium salt
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包裝:25克
CAS號:3105-55-3
C4H3O4Na=138.05
級別:BR
含量:~99.0%
水分:≤29.0%
鈉鹽:15~17%
性狀:粉末,,溶解度:Clear colorless solution at 50mg/ml in water
用途:生化研究,。
保存:RT