培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
喜樹(shù)堿溶液(5mM) | Camptothecin (5mM) | 400μl | 1~3天 |
商品介紹:
喜樹(shù)堿(Camptothecin,,CPT),,從Camptotheca acuminata(Camptotheca,喜樹(shù))的樹(shù)皮和樹(shù)干中分離到的一種類(lèi)生物堿,,呈現(xiàn)出抗白血病和腫瘤特性,。喜樹(shù)堿是一種有效的拓?fù)洚悩?gòu)酶I(Topoisomerase I, Topo I)抑制劑,不可逆結(jié)合DNA-Topo I復(fù)合物,,抑制Topo I切割后DNA的重新結(jié)合,,并且以共價(jià)連接DNA的方式固定化酶。該酶復(fù)合物隨后發(fā)生泛素化并被26S蛋白酶體破壞,,最終將胞內(nèi)拓?fù)洚悩?gòu)酶消耗殆盡,。低濃度的喜樹(shù)堿可停滯細(xì)胞周期在S期,并以細(xì)胞周期依賴(lài)或者非依賴(lài)的方式誘導(dǎo)大量正?;虬┳兗?xì)胞發(fā)生凋亡,。 |
喜樹(shù)堿常被用來(lái)誘導(dǎo)并建立細(xì)胞凋亡模型,其在體外按照劑量依賴(lài)的表現(xiàn)誘導(dǎo)凋亡發(fā)生,。本品以溶于DMSO的母液形式提供,,濃度為5mM,只需加入細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋到需要的工作濃度即可,,操作簡(jiǎn)單方便,。
英文別名:(+)-camptothecin;(S)-camptothecin;21,22-Secocamptothecin-21-oic acid; lactone 20(S)-camptothecin; (S)-(+)-camptothecin; NSC100880;
CAS:7689-03-4
分子式:C20H16N2O4
分子量:348.36
純度:>98 %
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
輕肽鐵蛋白(FTL)elisa試劑盒英文名稱(chēng):FTL ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框220抗體包裝5g
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)elisa試劑盒英文名稱(chēng):NEFL ELISA Kit鈣磷蛋白1抗體包裝1g
親環(huán)B(CYPB)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CYPB ELISA Kit鈣磷蛋白2抗體包裝25mg
親環(huán)A(CYPA)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CYPA ELISA Kit磷化通道相互作用蛋白3抗體包裝1g
鞘磷脂(SPH)elisa試劑盒英文名稱(chēng):SPH ELISA Kit16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體包裝250mg
鞘1磷酯受體1(S1PR1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):S1PR1 ELISA Kit視錐感光環(huán)磷鳥(niǎo)苷門(mén)控通道蛋白CNG3抗體包裝5g
鞘1磷酯裂解1(SGPL1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):SGPL1 ELISA Kit環(huán)核苷門(mén)控陽(yáng)離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體包裝1g
橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DSC1 ELISA Kit非受體酪激c-Abl抗體包裝100MG
強(qiáng)啡肽(Dyn)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Dyn ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體包裝100MG
前腦啡肽(PENK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PENK ELISA Kit甘油二酯膽堿磷轉(zhuǎn)移抗體包裝25mg
前列腺性磷(ACP3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ACP3 ELISA Kit嗜鉻粒B抗體包裝1g
前列腺E受體2(EP2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):EP2 ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體包裝5g
前列腺E合2(PTGES2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PTGES2 ELISA Kit色P450Ⅱj3抗體包裝1g
前膠原C端蛋白增強(qiáng)子1(PCPE1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PCPE1 ELISA Kit鈣激活離子通道4抗體包裝250mg
前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PKR1 ELISA Kit周期依賴(lài)性激6抗體包裝5g
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,合物標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子試劑盒紫草苷;Lithosprmoside
拘櫞桿菌Citrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98.5%,BR,二合物腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3試劑盒豬去氧膽;Hyodeoxycholic
: F536資源名稱(chēng): 黃曲霉 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2試劑盒竹節(jié)香附A;Raddeanin(Ane
喜樹(shù)堿溶液(5mM)乙鈰
其他 醋鈰,;醋鈰(III),;醋鈰(III)水合物;醋亞鈰,;乙鈰(III),;乙亞鈰
英文名稱(chēng): Cerium(III) acetate hydrate
其他英文名稱(chēng): Cerium Acetate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.9%
包 裝: 25克/100克/500克
CAS號(hào):206996-60-3
(CH3CO2)3Ce•xH2O=317.25 (anhydrous basis)
級(jí)別:AR
含量:≥99.9%(REO)
性狀:無(wú)色晶體,,極易潮解,,易溶于水。
用途:生化研究,。用于化學(xué)工業(yè)添加劑,、催化劑。用于汽車(chē)尾氣凈化
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