商品介紹:
哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,,雙鏈斷裂(DSB)的基因組DNA 是一種潛在的致命病變。現(xiàn)已確知DSB 的形成為導(dǎo)致H2A 組蛋白的磷酸化。具體來說,,在DNS 雙鏈斷裂處形成DNA 灶的過程中,,DNA 損傷誘導(dǎo)劑可以誘導(dǎo)組蛋白變體H2AX 的在Ser139 位點(diǎn)上的磷酸化。磷酸化的H2AX 有利于募集蛋白質(zhì)從而幫助DSB 部位進(jìn)行修復(fù),。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,,磷脂酰肌醇3-激酶樣蛋白激酶,如ATM,,ATR,、DNA-PKCs 蛋白,以及磷酸化的組蛋白變體,,H2AX,。 |
我司DNA 損傷試劑盒通過高內(nèi)涵分析可以對(duì)于同一細(xì)胞的健康參數(shù)、遺傳毒性和細(xì)胞毒性進(jìn)行同時(shí)定量分析,。通過以磷酸化的H2AX(Ser139)抗體檢測(cè)DNA 損傷,,可以對(duì)遺傳毒性進(jìn)行分析,進(jìn)而反映DNA 損傷情況,。而細(xì)胞毒性的分析是通過試劑盒提供的死活細(xì)胞核染料進(jìn)行染色區(qū)分鑒定的,。
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)elisa試劑盒英文名稱:AGRP ELISA Kit鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體包裝1g
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶8(FUT8)elisa試劑盒英文名稱:FUT8 ELISA Kit緊密連接蛋白1抗體包裝250mg
煙酰胺腺嘌呤二核苷磷(NAADP)elisa試劑盒英文名稱:NAADP ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體包裝1g
亞硫鹽氧化酶(SUOX)elisa試劑盒英文名稱:SUOX ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝250mg
血幼素(HJV)elisa試劑盒英文名稱:HJV ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝1g
血小板因子4(PF4)elisa試劑盒英文名稱:PF4 ELISA Kit磷化淋巴衍生C-型凝集素抗體包裝250mg
血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(PDGFRL)elisa試劑盒英文名稱:PDGFRL ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框39抗體包裝5g
血小板衍生生長(zhǎng)因子C(PDGFC)elisa試劑盒英文名稱:PDGFC ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
血小板衍生生長(zhǎng)因子B(PDGFB)elisa試劑盒英文名稱:PDGFB ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝250mg
血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)elisa試劑盒英文名稱:PDGFA ELISA Kit科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體包裝5g
血小板激活因子乙酰解酶2(PAFAH2)elisa試劑盒英文名稱:PAFAH2 ELISA Kit磷化角蛋白8抗體包裝100g
血小板激活因子(PAF)elisa試劑盒英文名稱:PAF ELISA Kit磷化角蛋白8抗體包裝25g
血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)elisa試劑盒英文名稱:THBS4 ELISA Kit磷化角蛋白18抗體包裝5g
血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)elisa試劑盒英文名稱:THBS3 ELISA Kit胞粘蛋白2抗體包裝5ml
血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)elisa試劑盒英文名稱:THBS2 ELISA Kit色素CPA6抗體包裝1g
ADP核糖基化因子5抗體白介素1家族成員9(IL1F9)N/A
DNA損傷/斷裂分析試劑盒異檸檬脫氫酶
英文名稱:ICDH
其他英文名稱:Isocitrate dehydrogenase,;Isocitric Dehydrogenase (NADP) from porcine heart,;Threo-Ds-Isocitrate: NADP+ oxidoreductase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,3-20u/mg,,液體
包裝:25毫克
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,0.5-3u/mg,粉末
包裝:500毫克
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,3-20u/mg,,液體
包裝:100毫克
CAS號(hào):9028-48-2
級(jí)別:BR
活力:3~20 units/mg protein (approx. 0.1% of that activity is obtained with NAD as cofactor.)
級(jí)別:Purified
活力:≥50units/mg solid
活力定義:One unit will produce a ΔA530 of 0.001 per min at pH 6.5 at 30 °C in a 3 mL reaction volume using syringaldazine as substrate
性狀:褐色粗糙酮粉
用途:生化研究。
保存:-20℃