操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):HDAC抑制劑(CI-994)
英文名稱(chēng):CI-994 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg 發(fā)貨周期:1~3天 CI-994(Tacedinaline)是組蛋白脫乙酰酶(HDAC)的抑制劑,,抑制重組HDAC1,2and3的IC50值分別為0.9,0.9,1.2μM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):112522-64-2 別名:Acetyldinaline;Tacedinaline;PD 123654;Goe 5549 純度:99.08% 分子量:269.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
細(xì)枝孢磷化中心粒蛋白Nudel抗體Human CASP3(Caspase-3) ELISA Kit晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒
嗜中溫寒冷桿菌類(lèi)固脫氫樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒
弓形蟲(chóng)(NT株)磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA試劑盒
短短芽孢桿菌磷化谷受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒
漢遜德巴利酵母磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CASP1(Caspase-1) ELISA Kit金葡菌腸(SE)ELISA試劑盒
銀灰口蘑磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CDH5(Cadherin-5) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)ELISA試劑盒
亮白曲霉磷化IKB α抗體Human IFNW1(Interferon omega-1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)ELISA試劑盒
磷化IKB alpha抗體Human DLK-1(Protein delta homolog 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白33(ADAM33)ELISA試劑盒
毛頭鬼傘(雞腿菇)磷化核因子活化T胞漿蛋白2抗體Human SOST(Sclerostin) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白19(ADAM19)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰腺嘌呤二核苷磷抗體Human PYY(Peptide YY) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白15(ADAM15)ELISA試劑盒
楊葉點(diǎn)霉增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體Human ANGPTL3(Angiopoietin-related protein 3) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白12(ADAM12)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human ACO1(Aconitase 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)ELISA試劑盒
露濕漆斑菌磷化核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體Human AOC3(Membrane primary amine oxidase) ELISA Kit解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:1500USP u/mg,豬源絡(luò)塞維
出芽短梗霉=出芽茁霉(黑酵母)Aspergillus│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:95%,美國(guó)進(jìn)口原裝絡(luò)塞琳
粘質(zhì)沙雷菌Serratia│marcescens 質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進(jìn)分紅景天苷
HDAC抑制劑(CI-994)金黃三羧
其他金精三羧
英文名稱(chēng):ATA
其他英文名稱(chēng):Aurintricarboxylic acid
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,85%
包裝:5克/25克
CAS號(hào):4431-00-9
C22H14O9=422.34
級(jí)別:BR
含量:≥85%
熔點(diǎn):≥300℃
性狀:深紅色至褐色粉末。溶于1 M NH4OH:10mg/ml
用途:生化研究,。昆蟲(chóng)組織學(xué)染色
保存:RT