培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
ARQ-092是一種有效的選擇性和變構(gòu)型Akt抑制劑,,對(duì)Akt1,,Akt2,Akt3的IC50分別為2.7nM,,14nM和8.1nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1313881-70-7 純度:98.07% 分子量:432.52 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
匍匐曲霉重組髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白1-125Anti-GRTP1 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒
Rhodobacter vinaykumarii雙微體2癌基因抗原Anti-GRM8 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GSDME Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒
污黑腐皮殼三聚與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物Anti-GSDMC Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒
假單胞菌三聚與牛血清白蛋白偶聯(lián)物Anti-GSK3B Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)ELISA試劑盒
小麥紋枯與牛血清白蛋白偶聯(lián)物Anti-GSPT1 Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)ELISA試劑盒
熒光威克酵母髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白(活性多肽)Anti-GSTA1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)ELISA試劑盒
釀酒酵母冰/與牛血清蛋白偶聯(lián)物Anti-GTF2A1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)ELISA試劑盒
Shinella kummerowiae Lin et al.辣根過氧化物標(biāo)記三聚Anti-GTF3C2 Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒
無色桿菌屬三聚偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GTF3A Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒
產(chǎn)蝦青鞘鞍單胞菌三聚偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GSTM2 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)ELISA試劑盒
針猴頭三聚偶聯(lián)牛IgGAnti-GTF2H1 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)ELISA試劑盒
庫爾勒海洋桿菌甲硝唑偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GTPBP2 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒
外外安德倫茨氏菌三聚與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Anti-GTF3C3 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒
巴西果小克銀漢霉神經(jīng)元特異性烯化抗原Anti-GTF3C2 Antibody人抗紅抗體(RBC)ELISA試劑盒
指狀青霉Nogo-66 (1-40)Anti-GTPBP2 Antibody人抗紅抗體(RBC)ELISA試劑盒
鈉離子肌轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體木霉紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK2抗體擬康氏木霉人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK3抗體木木霉人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK4抗體雅致枝霉黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞
變構(gòu)型Akt抑制劑(ARQ-092)對(duì)基磺酰胺
其他 磺胺;磺酰胺,;磺胺,;磺酰胺;磺酰胺,;4-基磺酰胺,;1-甲基-4-乙氧羰基-5-磺酰基吡唑
英文名稱: Sulfanilamide
其他英文名稱: p-Aminobenzene sulfonamide,;4-Aminobenzene sulfonamide,;p-Aniline sulfonamide; Sulfamidyl,;p-Sulfamidoaniline
產(chǎn)品規(guī)格: AR,,99.8%
包裝:100克
CAS號(hào):63-74-1
C6H8N2O2S=172.21
級(jí)別:AR
含量:≥99.8%
熔點(diǎn):164.5~166.5℃
干燥失重:≤0.1%
硫鹽:≤0.01%
氯化物:≤0.002%
氫氧化鈉溶解試驗(yàn):合格
度:合格
鐵:≤0.0005%
重金屬:≤0.0005%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.02%
性狀:無色或結(jié)晶粉末,。無氣味。味微苦,。1g溶于約37ml 乙,、約5ml,溶于二,、甘油,、鹽、沸水和苛性堿溶液,,微溶于水,,幾乎不溶于和。對(duì)石蕊呈中性反應(yīng),。0.5%水溶液pH為5.8~6.1,。大吸收波長(zhǎng) 257、313nm,。半數(shù)致死量(狗,,經(jīng)口)2000mg/kg。有刺激性
用途:生化研究,。用于亞硝鹽的測(cè)定,。有機(jī)合成。
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