詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):HIF-1抑制劑(SYP-5)
英文名稱(chēng):SYP-5 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 SYP-5是一種新型HIF-1抑制劑,,抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和血管生成。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1384268-04-5 純度:98.06% 分子量:312.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
枯草芽孢桿菌Pichia farinosa
*紅城紅球菌Pichia farinosa
香草蘭根疾Pichia farinosa
黃綠鏈霉菌Pichia membranifaciens
拉曼被孢霉Pichia membranifaciens
毛頭鬼傘(雞腿菇)Pichia membranifaciens
解脂假絲酵母Hansenula subpelliculosa
抗生鏈霉菌Pichia membranifaciens
細(xì)鏈格孢Yarrowia lipolytica
金孢菌寄生Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏菌Trichosporon cutaneum
蒼黃鏈霉菌Geotrichum candidum
雅致枝霉Saccharomyces cerevisiae
猴頭菌Saccharomyces cerevisiae
嬰兒配方乳粉 ?;?/span> Saccharomyces cerevisiae
芒果土賴(lài)芽胞桿菌Candida parapsilosis
小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 青蒿琥酯
小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
小鼠大內(nèi)皮(Big ET)免疫試劑盒Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 青蒿
小鼠大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 青蒿乙
HIF-1抑制劑(SYP-5)Amberlite XAD4離子交換大孔吸附樹(shù)脂
英文名稱(chēng):Amberlite XAD4
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,20-60目
包裝:500毫升
CAS號(hào):37380-42-0
級(jí)別:BR
Autoignition temp:800 °F
Matrix:styrene-divinylbenzene
Particle size :20~60 mesh
Pore size:~0.98mL/g pore volume;40 ? mean pore size
Surface area:725 m2/g
Density:1.02 g/mL at 25℃(true wet);1.08 g/mL at 25℃(skeletal)
性狀:玻璃粉,,大孔酚醛系吸附樹(shù)脂,。易于吸附大分子量的水溶性有機(jī)物
用途:生化研究。吸附樹(shù)脂用于去除蛋白,、高分子量著色劑、有機(jī)雜質(zhì),。用于純化方面的具體應(yīng)用如下:基和生物堿類(lèi)物質(zhì)的脫色,、蛋白質(zhì)去苦味、載體,;提取蛋白質(zhì),、多肽和動(dòng)植物有效成份;水解:脫色,、除去蛋白質(zhì),、雜質(zhì)離子,糠醛等會(huì)影響口味的離子,;有機(jī):脫色(發(fā)酵法有機(jī),,如檸檬、乳)
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