Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒正在出售的產(chǎn)品：生物素標(biāo)記的小鼠抗人IgM替莫唑Human
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgM托瑞米芬Human, Mouse, Rat
FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgM拓?fù)涮婵蝶}鹽Human, Mouse, Rat
Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgM維酰酚Human, Mouse, Rat
Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgM維羅非尼,RG7204Human, Mouse

中文名稱：Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

發(fā)貨周期：1～3天

試劑盒組份：

Annexin V-FITC——————100μl

Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml

碘化丙啶染色液——————220μl

Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。

Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine,，簡(jiǎn)稱PS),。磷脂酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè),。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,，不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè),。磷脂酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng),。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。

用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V,，即Annexin V-FITC,，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。

本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞,，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合,，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光,。

本試劑盒的流式檢測(cè)效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測(cè)效果參考圖3,。

1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的效果圖,。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后，用本試劑盒染色,，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測(cè),。從圖中可以看出,，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽(yáng)性并且PI染色陰性的細(xì)胞,，即凋亡細(xì)胞,，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽(yáng)性的細(xì)胞,，即壞死細(xì)胞,，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽(yáng)性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測(cè)誤差,。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型,、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,，圖中數(shù)據(jù)僅供參考,。

2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)效果驗(yàn)證圖,。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)后,，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B),、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C),、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出,，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A),，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽(yáng)性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的細(xì)胞,，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的凋亡細(xì)胞和雙陽(yáng)性的壞死細(xì)胞,。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)*在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型,、細(xì)胞凋亡情況,、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考,。

儲(chǔ)存條件：4℃避光,，有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng)：

1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,，不可用于診斷或治療。

2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失,。

3,、禁止與其他品牌的試劑混用,，否則會(huì)影響使用效果。

4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。

5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。

6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收,，從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大,，則需要除去培養(yǎng)基,，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。

9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。

11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。

操作規(guī)程：

1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

血管生長(zhǎng)素(ANG)elisa試劑盒英文名稱：ANG ELISA KitAIMP2抗體包裝25g

血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)elisa試劑盒英文名稱：ANGPTL4 ELISA Kit乙酰膽堿酶抗體包裝5g

血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)elisa試劑盒英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit5-氨基乙酰酸合酶1抗體包裝10g

血管生成素4(ANG-4)elisa試劑盒英文名稱：ANG-4 ELISA Kit防御素α1/3抗體包裝50g

血管生成素2(ANG-2)elisa試劑盒英文名稱：ANG-2 ELISA KitABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體包裝1g

血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒英文名稱：ANG-1 ELISA Kit植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa試劑盒英文名稱：VCAM-1/CD106 ELISA KitA-Raf抗體包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit磷酸化A-Raf抗體包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit紅腺苷脫氨酶3抗體包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit雄激素結(jié)合蛋白抗體包裝10g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa試劑盒英文名稱：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit肝再生增強(qiáng)因子抗體包裝50g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-D ELISA KitAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-C ELISA Kit胎蛋白單克隆抗體（包被）包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)elisa試劑盒英文名稱：VEGF-B ELISA Kit胎蛋白單克隆抗體(檢測(cè))包裝1g

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒英文名稱：VEGF ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg

粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體白介素4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)移核糖核酸（酵母）

其他9014-25-9

英文名稱：t-RNA

其他英文名稱：t-Ribonucleic acid(yeast)；Transfer RNA,；Ribonucleic acid transfer from baker's yeast

產(chǎn)品規(guī)格：BR,，15～20A260單位/mg

包　　裝： 100毫克

CAS號(hào)：9014-25-9

級(jí)別：BR

含量：15～20A260單位/mg

電泳試驗(yàn)：合格

性狀：灰色至灰褐色粉末

用途：生化研究。蛋白質(zhì)生物合成中特異地轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,，并保證遺傳信息從核酸到蛋白質(zhì)準(zhǔn)確傳遞的一類小分子核糖核酸,。每種氨基酸有一種以上相應(yīng)的tRNA,，每個(gè)細(xì)胞約有40～70種不同的tRNA，分別由72～93個(gè)核苷酸組成,，其中5％～20％為稀有堿基,，相對(duì)分子量平均：為25 000，沉降系數(shù)4S,。不同tRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)不同,，但有共同的三葉草二級(jí)結(jié)構(gòu)特征。其中氨基酸臂上3′端-C-C-A-OH是結(jié)合氨基酸的位點(diǎn),，氨基酸的?；谔禺惖陌被RNA合成酶催化下附著于相應(yīng)tRNA3′端腺苷的3′羥基上；反密碼環(huán)中三個(gè)連續(xù)的核苷酸構(gòu)成反密碼子與核糖體上mRNA的密碼子互補(bǔ)結(jié)合,，使氨基酸準(zhǔn)確對(duì)號(hào)入座合成多肽鏈,。通過這種密碼-反密碼-氨基酸之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，保證了核酸到蛋白質(zhì)的信息準(zhǔn)確傳遞,。tRNA起了重要的接合(adaptor)作用

保存：2～8℃