詳細介紹
中文名稱:TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)
英文名稱:TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
產(chǎn)品規(guī)格:20T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒應用范圍廣,可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,,也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況,。 細胞在發(fā)生凋亡時,會激活一些DNA內(nèi)切酶,,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,,可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder,。 |
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)可以用來檢測組織細胞在凋亡晚期過程中細胞核DNA的斷裂情況,。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入FITC-12-dUTP,,從而可以用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測,。
本試劑盒對標記反應進行了優(yōu)化,,采用最佳比例的FITC-12-dUTP和未標記dNTP進行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標記尾巴",。該“標記尾巴"減少了相鄰摻入dNTP上標記基團的空間位阻,,增加每個斷裂片段上的熒光基團數(shù)目,,降低熒光基團相鄰后可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,,減少非特異性反應,。
試劑盒組份:
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
儲存條件:-20℃,,有效期一年。
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療,。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,,否則將會增加空白吸收,,從而影響檢測結果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。
9,、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可,。
生長分化因子11(GDF11)elisa試劑盒英文名稱:GDF11 ELISA Kit胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體包裝1g
生長分化因子1(GDF1)elisa試劑盒英文名稱:GDF1 ELISA Kit原腸胚雙向形成相關蛋白抗體包裝5g
滲透性糖蛋白(Pgp)elisa試劑盒英文名稱:Pgp ELISA Kit分裂周期蛋白CDC123抗體包裝100g
腎足蛋白(NPHN)elisa試劑盒英文名稱:NPHN ELISA Kit神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體包裝25g
腎臟腦蛋白(KIBRA)elisa試劑盒英文名稱:KIBRA ELISA Kit趨化樣因子超家族成員3抗體包裝100ml
腎損傷分子1(Kim1)elisa試劑盒英文名稱:Kim1 ELISA Kit染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體包裝25ml
腎(REN)elisa試劑盒英文名稱:REN ELISA Kit冷誘導RNA結合蛋白抗體包裝5ml
腎上腺能受體β3(ADRβ3)elisa試劑盒英文名稱:ADRβ3 ELISA Kit連接相關蛋白1抗體包裝25g
腎上腺能受體β2(ADRβ2)elisa試劑盒英文名稱:ADRβ2 ELISA Kit連接相關蛋白2抗體包裝5g
腎上腺能受體β1(ADRβ1)elisa試劑盒英文名稱:ADRβ1 ELISA Kit磷化周期依賴性激5抗體包裝250mg
腎上腺能受體α1A(ADRα1A)elisa試劑盒英文名稱:ADRα1A ELISA Kit異戊烯半胱羧基轉移抗體包裝1g
神經(jīng)源3(NEUROG3)elisa試劑盒英文名稱:NEUROG3 ELISA Kit鳥嘌呤核苷交換因子CLLD7抗體包裝5g
神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)elisa試劑盒英文名稱:NPTX1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員4抗體包裝25g
神經(jīng)元特異性烯化(NSE)elisa試劑盒英文名稱:NSE ELISA Kit趨化樣因子超家族成員7抗體包裝5g
神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)elisa試劑盒英文名稱:NT4 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員5抗體包裝5g
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格:純度98%轉錄因子E2F1 elisa試劑盒紫莖女貞苷B;Ligupurpurosi
玫瑰色庫克菌Kocuria│roseus 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%,USPgrade轉錄因子AP-1 elisa試劑盒紫莖女貞苷A ;Ligupurpuros
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,HPLC>99%,標準品轉化生長因子-β誘導蛋白IG-H3試劑盒左旋肉堿; L(-)-Carnitine
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(FITC)乙烯利
其他2-氯乙基磷;乙烯磷,;艾斯勒爾,;玉米健壯;(2-氯乙基)膦,;2-氯乙基膦
英文名稱:Ethephon
其他英文名稱:2-Chloroethylphosphonic acid;Chlorethephon
產(chǎn)品規(guī)格:AR,,85%
包 裝: 500克
CAS號:16672-87-0
C2H6ClO3P=144.49
級別:AR
含量:≥85.0%
度(以HC1計):≤10%
熔點:74~75℃
干燥失重:≤0.50%
性狀:結晶性粉末。易溶于酮,微溶于,,不溶于水,。毒性:小鼠急性經(jīng)皮LD50為1000毫克/公斤,。小鼠腹腔內(nèi)注射LD50150毫克/公斤。鯉魚LC50 (48小時)>40ppm,。對蜜蜂無毒
用途:生化研究,。植物生長及分析試劑。3-吲哚乙以及3-吲哚乙醛,、3-吲哚乙腈、抗壞血等茁長類物質(zhì)在自然界天然存在,,3-吲哚乙在植物體內(nèi)生物合成的前體是色,。茁長的基本作用在于調(diào)節(jié)植物的生長,不僅能促進生長,,而且具有抑制生長和器官建成的作用,。茁長在植物細胞內(nèi)不僅以游離狀態(tài)存在,還可以與生物高分子等牢固結合的束縛型茁長存在,,也有與特殊物質(zhì)形成結合物的茁長,例如吲哚乙?;扉T冬酰胺,、吲哚乙阿戊糖和吲哚乙酰葡萄糖等。這可能是茁長在細胞內(nèi)的一種貯藏方式,,也是解除過剩茁長毒害的方式
保存:RT,,避光
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)