詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
GW 441756 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
GW441756是特異的高活性原肌球蛋白相關(guān)激酶A(TrkA)抑制劑,,IC50為2nM,,對c-Raf1和CDK2幾乎無活性。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:504433-23-2 純度:99.00% 分子量:275.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
寡養(yǎng)單胞菌屬人輪狀病IgMAnti-TLK2 Antibody人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒
淺玫瑰小單孢菌大鼠遲現(xiàn)抗原Anti-TLR1 Antibody 人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌大鼠降鈣Anti-TMBIM1 Antibody人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒
Bacillus pervagus人艾柯病IgMAnti-TLR13 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
環(huán)帶青霉人抗呼吸道合胞病抗體Anti-TMBIM1 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
棉尾孢大鼠骨鈣/骨谷蛋白Anti-TMBIM1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒
金直絲鏈霉菌大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-TMBIM4 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒
釀酒酵母人麻疹病IgMAnti-TMC8 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
肺形側(cè)耳人柯薩奇病IgMAnti-TMEM101 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
泡盛曲霉大鼠促甲狀腺Anti-TMEM145 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌大鼠皮質(zhì)Anti-TMEM101 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)ELISA試劑盒
糞纖維單胞菌人柯薩奇病IgGAnti-TMEM173 Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌大鼠雌二Anti-TMEM185A Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
短乳桿菌人結(jié)核菌桿抗體IgGAnti-TMEM30B Antibody人泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
紅球菌人瘢痕性天皰瘡抗體Anti-TMEM237 Antibody人泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
生癌腸桿菌大鼠脫氫表雄硫酯Anti-TMEM30CP Antibody人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒
神經(jīng)突起生長誘導因子受體UNC5D抗體蘇云金芽孢桿菌黑克亞種抗孕7
神經(jīng)突起生長誘導因子受體Unc5a抗體蘇云金芽孢桿菌幕蟲亞種抗睪小鼠7
UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體蘇云金芽孢桿菌以色列亞種抗型肝炎病毒NS5抗原單克抗體7株
泛硫酯L3抗體蘇云金芽孢桿菌日本亞種抗戍型肝炎病毒單克抗體7株
TrkA抑制劑(GW 441756)崩潰
英文名稱:Driselase from Basidiomycetes sp
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,10%
包裝:1克/5克
CAS號:85186-71-6
級別:BR
Protein:≥10% biuret
纖維活力Cellulase activity:≥100u/g solid
活力定義Unit definition:One unit will liberate 1.0 micromole of glucose from cellulose in one hour at pH 5.0 at 37℃
昆布糖活力laminarinase activity:≥10u/g solid
活力定義:One unit will liberate 1.0 mg reducing sugar (as glucose)from Laminarin per minute at pH 5.0 at 37℃
木聚糖活力Xylanase activity:≥3u/g solid
來源:牛血
活力:2500~7000 units/mg protein
活力定義:One unit will inhibit reduction of cytochrome c by 50% in a coupled system with xanthine oxidase at pH 7.8 at 25℃ in a 3.0 mL reaction volume. Xanthine oxidase concentration should produce an initial ΔA550 of 0.025 ± 0.005 per min
來源:豬血
活力:2500~7000u/mg protein
性狀:粉紅色粉末或固體。催化O2-+O2-+2H+=H2O2+O2反應(yīng)含有兩個相同的亞單位,。按其金屬輔離子不同分為三種類型:Cu-Zn-SOD,,每一個亞單位含銅和鋅離子各一個分子量34000±(4%);Mn-SOD,,分子量400000,;Fe-SOD,分子量約40000
性狀:淡藍色粉末,,由紅細胞,、肝和其他哺乳動物組織分離而得的金屬蛋白,。催化O2-+O2-+2H+=H2O2+O2反應(yīng)含有兩個相同的亞單位。按其金屬輔離子不同分為三種類型:Cu-Zn-SOD,,每一個亞單位含銅和鋅離子各一個分子量34000±(4%),;Mn-SOD,分子量400000,;Fe-SOD,,分子量約40000
用途:生化研究。是催化O2-+O2-+2H+H2O2+O2反應(yīng)的,,它普遍存在于需氧化物中,,保護機體對抗氧自由基的作用,是一種重要的氧自由基劑,。
保存:-20℃