詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑(Azaserine)
英文名稱:Azaserine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Azazerine是競爭性谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:115-02-6 別名:CN-15757;CI-337;O-Diazoacetyl-L-serine;P-165 純度:99.91% 分子量:173.13 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測,。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
棲藻海桿狀菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
紫荊假諾卡氏菌Candida guilliermondii
佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
棕灰口蘑Candida kefyr
嗜油假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希菌Candida valida
土星擬威爾酵母Pichia farinosa
蘇云金芽孢桿菌Pichia farinosa
小單孢菌Pichia membranifaciens
香菇*Saccharomyces cerevisiae
阿木吉氏鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
太湖類芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
脆弱擬桿菌Saccharomyces cerevisiae
絳紅褐游動放線菌Saccharomyces bayanus
米曲霉Saccharomyces cerevisiae
小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 黃芪甲苷
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 黃芪皂苷I
小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 黃芪皂苷II
小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 黃芪皂苷III
谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑(Azaserine)DL-谷酰胺
其他DL-羰基??;DL-酰胺;DL-谷酰胺
英文名稱:DL-Glutamine
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克
CAS號:6899-04-3
C5H10N2O3=146.15
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:0o
干燥失重:≤0.3%
重金屬:≤10ppm
氯化物:≤0.02%
硫鹽:≤0.02%
銨鹽:≤0.1%
砷鹽:≤2ppm
鐵:≤10ppm
性狀:結(jié)晶粉末或棱柱體結(jié)晶,。18℃時,,1g溶于38.5ml水。熔點185-186℃(173-174.5℃),。
用途:生化研究
保存:RT,,避光