微管抑制劑（Cevipabulin）正在出售的產(chǎn)品：嗜熱鏈球 1-(2,3,4--氧苯甲基)哌胰島受體底物2Elisa
地衣芽孢桿 鹽酸阿比朵爾水合物胰島樣生長(zhǎng)因子1Elisa
淤泥金黃桿 2,4-二-5-硝基-6-甲基嘧啶胰島樣生長(zhǎng)因子1受體Elisa
葡萄座腔屬 3--2-羥基基烯酸酯胰島樣生長(zhǎng)因子2Elisa
綠色木霉 2,2'-二羥基-4,4'-二甲氧基二苯甲酮胰島樣生長(zhǎng)因子2受體Elis

中文名稱：微管抑制劑（Cevipabulin）

注意事項(xiàng)：

1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療,。

2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,，避免開蓋時(shí)試劑損失,。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,，否則會(huì)影響使用效果,。

4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。

8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,，則測(cè)定不含細(xì)胞,，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,，則可以直接加入 MTS ,，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基,，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作規(guī)程：

1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL × MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

鏈輪枝菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌Bacillus cereus

許旺酵母Bacillus subtilis subsp. subtilis

耐鹽深海球菌Bacillus megaterium

黑曲霉Bacillus subtilis subsp. subtilis

松口蘑Brevibacillus parabrevis

膠紋靈芝Bacillus amyloliquefaciens

佛羅里達(dá)側(cè)耳Bacillus pumilus

副雞嗜血桿菌Bacillus pumilus

解淀粉芽孢桿菌Bacillus fusiformis

克魯斯假絲酵母Bacillus megaterium

泡盛曲霉Bacillus licheniformis

貝倫格葡萄座腔菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

圓酵毛殼Bacillus subtilis subsp. subtilis

香菇Bacillus fusiformis

蕈狀芽孢桿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定用

產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒C型Clostridium│perfringens Type C 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

海紅色桿菌Erythrobacter│aquimaris 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
微管抑制劑（Cevipabulin）L-半胱

其他L-β-巰基,；L-半膀胱基, L-β-硫氫代, L-2-基-3-巰基,；L-硫氫化基

英文名稱：L-Cysteine

其他英文名稱：L-β-Mercaptoalanine；L-2-Amino-3-mercaptopropanoic acid,； L-α-Amino-β-thiopropionic acid,；(R)-2-Amino-3-mercaptopropionic acid

產(chǎn)品規(guī)格：BR,99%

包裝：25克/100克/500克

CAS號(hào)：52-90-4

C3H7NO2S=121.16

級(jí)別：BR

含量：≥99.0%

比旋光度：8.3～9.5°

氯化物：≤0.02%

銨鹽：≤0.02%

硫鹽：≤0.003%

重金屬：≤10ppm

砷鹽：≤1ppm

鐵鹽：≤10ppm

干燥失重：≤0.5%

性狀：結(jié)晶或結(jié)晶粉末。其中性或微堿性水溶液能被空氣氧化成胱,，性溶液較為穩(wěn)定,。溶于水,、乙、水和乙,，不溶于,、、乙乙酯,、二硫化碳,。熔點(diǎn)240℃(分解)。比旋光度［α］25D＋6.5°(5mol/L鹽中),。有刺激性

用途：生化及營養(yǎng)研究,，制備組織培養(yǎng)基

保存，RT,，避光