詳細(xì)介紹
中文名稱(chēng):淋巴細(xì)胞分離液1.077
英文名稱(chēng):Lymphocyte Separation Medium 1.077
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium,,簡(jiǎn)稱(chēng)LSM)是一種無(wú)菌的即用型分離液,,基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過(guò)一些改良,,使得操作簡(jiǎn)單快速且分離效率更高,。每100 ml淋巴細(xì)胞分離液中含有6.2 g 聚蔗糖(Ficoll)和9.4 g 泛影酸鈉,,20℃下的密度為1.0770-1.0800 g/ml,。不僅適用于外周血淋巴細(xì)胞,,也可分離其他組織來(lái)源的淋巴細(xì)胞,,包括臍帶血和骨髓細(xì)胞。 |
工作原理
去纖維蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋?zhuān)釉诜蛛x液上層,,之后低速離心30 min,。在離心過(guò)程中,差速遷移使其終形成幾個(gè)細(xì)胞分層,。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞,,通過(guò)梯度遷移至管底。根據(jù)其密度的大小,,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞如單核細(xì)胞,,以及血小板分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收,,并通過(guò)進(jìn)一步清洗來(lái)去除血小板,,LSM和血漿。
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
鄰二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sufacetamide sodium角蛋白8抗體包裝100g
鄰磺酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sulpiridec-mer原癌基因酪激抗體包裝25g
鄰青霉 ;唑西林鈉英文名稱(chēng): TadalafilⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝5g
鄰位酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TadalafilⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體包裝100g
鄰乙酰楊/阿司匹林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 17-AAG IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體包裝25g
林旦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 17-AAG前列腺氧化環(huán)化1抗體包裝500g
磷霉丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Terazosin HClⅠ型膠原抗體包裝1g
磷奧司他韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Testosterone Ⅴ型膠原抗體包裝5g
磷哌啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Testosterone Ⅹ型膠原抗體包裝1g
磷吡哆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetracaine HCl周期F抗體包裝250mg
磷吡哆丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetracaine HCl泛連接CUL7蛋白抗體包裝5g
磷伯安喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tolazoline HCl狀腺受體相互作用蛋白15抗體包裝1g
磷川芎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tolterodine Tartrate信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體包裝25g
磷二氫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tolterodine Tartrate信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體包裝5g
磷肌鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Topiramate心肌肌鈣蛋白抗體包裝1g
生黃桿菌Flavobacterium│hydatis 質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR纖溶抗纖溶復(fù)合物試劑盒拓?fù)涮婵?Topotecan
大豆接合酵母Zygosaccharomyces│soja 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定纖溶/纖維蛋白溶試劑盒檀香;Santalol
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于培養(yǎng)纖連蛋白試劑盒麝香;Musk ketone
淋巴細(xì)胞分離液1.077煙肌酯
其他肌煙酯;肌六煙酯,;煙肌酯,;煙?。粺燐|肌酯
英文名稱(chēng):Inositol niacinate
其他英文名稱(chēng):myo-Inositol hexanicotinate,;myo-Inositol hexa-3-pyridinecarboxylate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,98%
包裝:25克
CAS號(hào):6556-11-2
C42H30N6O12=810.72
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):254~256℃
性狀:粉末
用途:生化研究。
保存:RT
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)