培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Hesperadin是ATP競爭性Aurora B抑制劑,,IC50為250nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:422513-13-1 純度:99.67% 分子量:516.65 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
釀酒酵母磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NR1H4 Antibody膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)ELISA試劑盒
秀珍菇核糖核蛋白抗原抗體Anti-NR1I2 Antibody膜聯(lián)蛋白A13(ANXA13)ELISA試劑盒
雞傳染性支氣管炎病血影蛋白A鏈非紅型/收縮蛋白/Spectrin α抗體Anti-NR2F2 Antibody膜聯(lián)蛋白A11(ANXA11)ELISA試劑盒
球孢白僵菌P物質(zhì)抗體Anti-NR2F6 Antibody膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)ELISA試劑盒
榆耳生長抑受體1抗體Anti-NR3C1 Antibody膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒
香菇生長抑受體2抗體Anti-NR3C1 Antibody(PB0325)膜輔蛋白(MCP)ELISA試劑盒
Thermoactinomyces?生長抑受體5抗體Anti-NR3C2 Antibody免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白家族成員2(WASF2)ELISA試劑盒
Nocardioides突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體Anti-NR4A1 Antibody免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白(WASP)ELISA試劑盒
聚多曲霉信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Anti-NR4A1 Antibody免疫球蛋白樣EGF樣域酪激1(Tie1)ELISA試劑盒
Microbacterium flavum干燥癥SSB/La抗體Anti-NR3C2 Antibody免疫球蛋白超家族成員16(IGSF16)ELISA試劑盒
傘形卷霉富含半胱的性分泌蛋白抗體Anti-NR4A2 Antibody免疫球蛋白λ(Igλ)ELISA試劑盒
釀酒酵母信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Anti-NR5A1 Antibody免疫球蛋白κ(Igκ)ELISA試劑盒
細(xì)鏈格孢信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體Anti-NR5A2 Antibody免疫球蛋白J鏈(IgJ)ELISA試劑盒
柱狀田頭菇信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體Anti-NRF1 Antibody免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒
氈狀金孢霉非受體型酪蛋白激抗體Anti-NRF1 Antibody免疫球蛋白A2(IgA2)ELISA試劑盒
靈芝滑膜凋亡抑制物1抗體Anti-NRG1 Antibody免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA試劑盒
跨膜蛋白Orai2抗體Paenibacillussputi人淋巴成纖維細(xì)胞提取物
八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體Paenibacillusagarexedens人臍帶單核細(xì)胞提取物
泛特異性蛋白OTB1抗體Corynebacteriumdoosanense人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物
O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體馬里斯棒狀桿菌人卵巢成纖維細(xì)胞提取物
Aurora B抑制劑(Hesperadin)固紫醬GBC鹽
其他重氮色鹽紫醬;堅牢紫醬GBC鹽,;熒光重氮色鹽紫醬,;棗紅色基GBC;棗紅貝司GBC,;紫醬色基GBC,;固深紅GBC;堅牢醬紫GBC鹽
英文名稱:Fast Garnet GBC salt
其他英文名稱:Fast Garnet GBC sulfate salt,;2-Methyl-4-([2-methylphenyl]azo)benzenediazonium salt,;4-Amino-2′,3-dimethylazobenzene diazotated;Azoic Diazo No. 4
產(chǎn)品規(guī)格:高純,,90%
包裝:1克/5克
CAS號:101-89-3
C14H14N4O4S=334.35
級別:High purity grade
含量:>90%
性狀:紫色或黃棕色粉末,,游離胺熔點100℃。有窒息的特殊氣味,,不溶于水,,在重氮化時必須研細(xì)并攪拌。與色酚AS,,AS-D和AS-BS偶合呈棗紅色,。商品也有為氟硼鹽和氯化鋅復(fù)鹽者,通常約含25%染料,,較純的約含染料75%
用途:生化研究,。測定性磷、脂和基肽,。蛋白質(zhì)染色
Nitrogen:4.1~5.9%
性狀:棗紅色或棕色粉末,,易溶于水,熔點為150℃(分解),。λmax 457 nm
用途:生化研究,。染色劑
保存:RT