詳細介紹
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細胞00μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:kFluor647-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:20T|10T|50T
發(fā)貨周期:1~3天
細胞增殖檢測是評估細胞健康程度,、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法,。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破,。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈,。EdU法檢測是基于“點擊"反應,,一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應,。 |
本試劑盒中,EdU試劑含有炔烴,,而kFlour647染料試劑含有疊氮化合物,。點擊法的EdU標記增殖快速有效,易于使用,。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的EdU,。標準化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞,而brdu方法則需要DNA變性(如酸變性,、熱變性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,,從而方便BrdU抗體結(jié)合。
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復凍融,,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可,。
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)elisa試劑盒英文名稱:E-Cadherin ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3α包裝5g
CXC趨化因子配體1(CXCL1)elisa試劑盒英文名稱:CXCL1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體包裝25g
CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)elisa試劑盒英文名稱:FKN/CX3CL1 ELISA Kit腦鈉素抗體包裝5g
CD80分子(CD80/B7-1)elisa試劑盒英文名稱:CD80/B7-1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體包裝100g
CD30配體(sCD30 L)elisa試劑盒英文名稱:sCD30 L ELISA Kit抑凋亡基因bag1抗體包裝25g
B細胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)elisa試劑盒英文名稱:BAFF/CD257/TNFSF13B ELISA Kit蛙皮素受體3抗體包裝5g
10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒英文名稱:IP-10/CXCL10 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體包裝1g
10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP-10)elisa試劑盒英文名稱:IP-10 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體包裝25g
左右決定因子2(LEFTY2)elisa試劑盒英文名稱:LEFTY2 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5g
左右決定因子1(LEFTY1)elisa試劑盒英文名稱:LEFTY1 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝100g
組織因子通道抑制因子(TFPI)elisa試劑盒英文名稱:TFPI ELISA Kit磷化Bcl-xL蛋白抗體包裝25g
組織因子(TF)elisa試劑盒英文名稱:TF ELISA Kit神經(jīng)母瘤相關蛋白ARID3B抗體包裝5g
組織型纖溶酶原激活因子(tPA)elisa試劑盒英文名稱:tPA ELISA Kit微管蛋白β4抗體包裝1g
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)elisa試劑盒英文名稱:TIMP4 ELISA Kit霍亂腸素β鏈抗體包裝5g
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)elisa試劑盒英文名稱:TIMP3 ELISA Kitβ晶體蛋白B1抗體包裝1g
AHNAK核蛋白2抗體干擾素α16(IFNα16)LDN193189 是一種選擇性的 BMP I 型受體抑制劑,抑制 ALK2 和 ALK3 的 IC50 分別為 5 nM 和 30 nM,。對 ALK4,,ALK
kFluor647-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)隱色孔雀石綠
其他無色孔雀石綠;隱性孔雀石綠,;二(對二甲基基)基甲烷,;隱色孔雀綠;還原孔雀綠
英文名稱:Leucomalachite Green
其他英文名稱:4,4′-Benzylidenebis(N,N-dimethylaniline)
產(chǎn)品規(guī)格:BR
包裝:1克/5克/25克
產(chǎn)品規(guī)格:分析標準品,,98%
包裝:100毫克
CAS號:129-73-7
C23H26N2=330.47
級別:BR
用途:生化研究,。生物染色劑,用于結(jié)核桿菌染色和其他抗性桿菌染色,。
保存:RT,,避光