商品介紹:
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對(duì)細(xì)胞進(jìn)行示蹤及增殖檢測(cè)的試劑盒,,由CFDA,SE粉末,、溶劑及相關(guān)細(xì)胞染色緩沖液組成,,該試劑盒主要工作原理為:CFDA, SE具有細(xì)胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),,后者可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光,,不能穿透細(xì)胞膜,,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上,,同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),,被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月,,因此非常適用于細(xì)胞群落分析。 |
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,,CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),,三次(1/8的熒光強(qiáng)度),,以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA,,SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多,。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能,。CFDA, SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),,也可用于成纖維細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞,,造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè),。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,Ex=494nm,,Em=521nm,,除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外,,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察,。
本品為CFDA,,SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒,包含配制CFDA,,SE儲(chǔ)存液所需的溶劑和細(xì)胞標(biāo)記用的染色緩沖液,,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作。另,,CFDA,SE標(biāo)記細(xì)胞一般15min即可完成,,對(duì)于不同細(xì)胞,需要自行摸索最佳標(biāo)記時(shí)間,。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為2ml計(jì)算,。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒 | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)elisa試劑盒英文名稱:ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)elisa試劑盒英文名稱:ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體包裝25g
結(jié)合珠蛋白(Hpt)elisa試劑盒英文名稱:Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)elisa試劑盒英文名稱:CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)elisa試劑盒英文名稱:CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體包裝25g
角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺(TGM1)elisa試劑盒英文名稱:TGM1 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)elisa試劑盒英文名稱:KRT9 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)elisa試劑盒英文名稱:KRT18 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)elisa試劑盒英文名稱:GDNF ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)elisa試劑盒英文名稱:CHRDL2 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)elisa試劑盒英文名稱:Alk-Smase ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)elisa試劑盒英文名稱:FGF2 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)elisa試劑盒英文名稱:SF3B3 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)elisa試劑盒英文名稱:CX43 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)elisa試劑盒英文名稱:MSLN ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪結(jié)合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪分化相關(guān)蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒乙銨
其他 乙铔,;醋銨,;乙銨鹽;醋
英文名稱: Ammonium acetate
其他英文名稱: Acetic acid ammonium salt
產(chǎn)品規(guī)格: AR,,98%
包裝:500克
CAS號(hào):631-61-8
C2H7NO2=77.08
級(jí)別:AR
含量:≥98.0%
pH(50g/L,,25℃):6.5~7.5
澄清度試驗(yàn):合格
鈣:≤0.001%
還原高錳鉀物質(zhì):≤0.01%
硫鹽:≤0.002%
磷鹽:≤0.0005%
氯化物:≤0.0005%
鎂:≤0.0004%
水不溶物:≤0.005%
鐵:≤0.0005%
重金屬:≤0.0005%
硝鹽:≤0.001%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.005%
性狀:無色結(jié)晶。稍有乙氣味,。極易潮解,。易溶于水和乙,微溶于酮。水溶液呈弱性,0.5mol/L水溶液的pH為7.0,。相對(duì)密度(d204)1.17,。熔點(diǎn)114℃。致死量(小鼠,靜脈)1.8mG(NH+4)/20G,。有刺激性,。
用途:生化研究。用以配制緩沖液,,測(cè)定鋁和鐵,。從其他硫鹽分離硫鉛
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