詳細介紹
商品介紹:
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對細胞進行示蹤及增殖檢測的試劑盒,,由CFDA,SE粉末,、溶劑及相關細胞染色緩沖液組成,該試劑盒主要工作原理為:CFDA, SE具有細胞膜滲透性,,本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),,后者可發(fā)強烈的綠色熒光,不能穿透細胞膜,,能完好的保留在胞內(nèi),。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上,,同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除,。經(jīng)CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定,,穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月,因此非常適用于細胞群落分析,。 |
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一,,優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一,。在細胞分裂增殖過程中,,CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半,,通過流式細胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強度的不同,,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2的熒光強度),,二次(1/4的熒光強度),,三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數(shù)的細胞,。CFSA,,SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,,且具有不會使鄰近細胞染色的功能,。CFDA, SE常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可用于成纖維細胞,,自然殺傷細胞,,造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光,,Ex=494nm,,Em=521nm,除了流式細胞儀檢測細胞增殖外,,還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目,,或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
本品為CFDA,,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒,,包含配制CFDA,SE儲存液所需的溶劑和細胞標記用的染色緩沖液,,簡化了實驗前期準備工作,。另,CFDA,SE標記細胞一般15min即可完成,,對于不同細胞,,需要自行摸索最佳標記時間,。按照每個樣本的標記體積為2ml計算。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)elisa試劑盒英文名稱:ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)elisa試劑盒英文名稱:ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64抗體包裝25g
結合珠蛋白(Hpt)elisa試劑盒英文名稱:Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)elisa試劑盒英文名稱:CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)elisa試劑盒英文名稱:CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白74B抗體包裝25g
角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺(TGM1)elisa試劑盒英文名稱:TGM1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)elisa試劑盒英文名稱:KRT9 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)elisa試劑盒英文名稱:KRT18 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質(zhì)細胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)elisa試劑盒英文名稱:GDNF ELISA Kit19號染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)elisa試劑盒英文名稱:CHRDL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)elisa試劑盒英文名稱:Alk-Smase ELISA Kit19號染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)elisa試劑盒英文名稱:FGF2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)elisa試劑盒英文名稱:SF3B3 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)elisa試劑盒英文名稱:CX43 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)elisa試劑盒英文名稱:MSLN ELISA Kit19號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脂肪結合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脂肪分化相關蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細胞增殖與示蹤檢測試劑盒乙銨
其他 乙铔;醋銨;乙銨鹽,;醋
英文名稱: Ammonium acetate
其他英文名稱: Acetic acid ammonium salt
產(chǎn)品規(guī)格: AR,,98%
包裝:500克
CAS號:631-61-8
C2H7NO2=77.08
級別:AR
含量:≥98.0%
pH(50g/L,25℃):6.5~7.5
澄清度試驗:合格
鈣:≤0.001%
還原高錳鉀物質(zhì):≤0.01%
硫鹽:≤0.002%
磷鹽:≤0.0005%
氯化物:≤0.0005%
鎂:≤0.0004%
水不溶物:≤0.005%
鐵:≤0.0005%
重金屬:≤0.0005%
硝鹽:≤0.001%
灼燒殘渣:≤0.005%
性狀:無色結晶。稍有乙氣味。極易潮解,。易溶于水和乙,微溶于酮。水溶液呈弱性,0.5mol/L水溶液的pH為7.0,。相對密度(d204)1.17。熔點114℃,。致死量(小鼠,靜脈)1.8mG(NH+4)/20G,。有刺激性。
用途:生化研究,。用以配制緩沖液,,測定鋁和鐵。從其他硫鹽分離硫鉛
保存:RT