操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細胞00μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Hsp90ATPase活性抑制劑
英文名稱:Retaspimycin Hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Retaspimycin hydrochloride是一種有效的Hsp90ATPase活性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:857402-63-2 別名:IPI-504 純度:95.0% 分子量:624.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復凍融,,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可,。
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: =ATCC7830資源名稱: 德氏乳桿菌乳亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)蛻皮激
塔賓曲霉Aspergillus│tubingensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)根皮苷
: =AS2.338資源名稱: 異常漢遜酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)梓
Hsp90ATPase活性抑制劑聚乙二800
其他 聚氧乙烯800;聚氧化乙烯800
英文名稱: PEG800
其他英文名稱: Polyethylene glycol 800
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:500克
CAS號:25322-68-3
分子式:HO(CH2CH2O)nH
級別:CP
平均分子量:770~840.0
pH(50g/L,,25℃):4.0~7.0
結(jié)晶點:≥24℃
澄清度試驗:合格
灼燒殘渣:≤0.1%
性狀:或淺黃色軟蠟狀半固體或片狀,。有輕微特殊氣味。微有吸濕性,。遇熱易熔化,。溶于水和乙
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度120℃,,溶劑為,、、二氯),,分離分析,、,、醛等含氧化合物,,聚四氟乙烯中水分,脂肪胺,,揮發(fā)油,。并被廣泛用作載體和毛細管柱內(nèi)壁的改性劑。有機合成,。
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