培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Reversine是一種ATP-競(jìng)爭(zhēng)性的Aurora kinase抑制劑,作用于Aurora A,,Aurora B和Aurora C,,IC50分別為400,500和400nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):656820-32-5 純度:99.25% 分子量:393.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大腸埃希菌轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移1(CHST1)ELISA試劑盒
土壤德沃斯氏菌絲/蘇激TLK2抗體Anti-IL18 Antibody糖合3(CHSY3)ELISA試劑盒
居真菌細(xì)菌硫氧環(huán)蛋白還原1抗體Anti-IL1B Antibody糖合1(CHSY1)ELISA試劑盒
Compostimonas跨膜蛋白173抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白M6B(GPM6B)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌跨膜蛋白147抗體Anti-IL18 Antibody(PB0057)糖蛋白M6A(GPM6A)ELISA試劑盒
諾卡氏菌Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白A33(GPA33)ELISA試劑盒
矩圓黑盤(pán)孢四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白)Anti-IL18 Antibody糖蛋白Ⅴ(GP5)ELISA試劑盒
銅綠假單胞菌四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白)Anti-IL18 Antibody羰基還原4(CBR4)ELISA試劑盒
淀粉產(chǎn)色鏈霉菌T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原1抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原3(CBR3)ELISA試劑盒
Bacillus aryabhattaiTM4SF3蛋白抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原1(CBR1)ELISA試劑盒
猴頭四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白)Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅻ(CA12)ELISA試劑盒
黃曲霉四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅸ(CA9)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌四分子交聯(lián)體12抗體(四旋蛋白)Anti-IL1R1 Antibody碳酐Ⅵ(CA6)ELISA試劑盒
傘形卷霉四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白)Anti-IL1RN Antibody碳酐ⅤB(CA5B)ELISA試劑盒
日本根霉四分子交聯(lián)體16抗體(四旋蛋白)Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅳ(CA4)ELISA試劑盒
多主棒孢霉四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白)Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅲ(CA3)ELISA試劑盒
溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體化膿性鏈球菌(釀膿鏈球菌)小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞
SNX27蛋白抗體腐皮鐮孢(斜面)小鼠腎小管上皮細(xì)胞
細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體費(fèi)舍爾弧菌小鼠腎足突細(xì)胞
S100A2抗體環(huán)狀芽胞桿菌小鼠腎成纖維細(xì)胞
Aurora激酶抑制劑(Reversine)海因
其他 4-咪唑啉二,;乙內(nèi)酰脲;咪唑烷基二,;2,4-咪唑烷基二
英文名稱(chēng): Hydantoin
其他英文名稱(chēng): 2,4-Imidazolinedione,;Imidazolidine-2,4-dione
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98.5%
包 裝: 100克/500克
CAS號(hào):461-72-3
C3H4N2O2=100.08
級(jí)別:BR
含量:≥98.5%
氯化物:≤50mg/㎏
重金屬:≤5mg/㎏
鐵鹽:≤10mg/㎏
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%
性狀:至微黃色粉末,,微溶于水,,溶于堿性氫氧化鈉溶液,溶于堿,,微溶于醚,。熔點(diǎn):218-223℃。
用途:生化研究,。應(yīng)用于化工,、紡織、生化等領(lǐng)
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