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詳細介紹
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8,、結果分析
a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱：Annexin V-EGFP/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱：Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
本試劑盒可應用于培養(yǎng)細胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）,。在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細胞膜脂質雙層的內(nèi)側,，而在細胞凋亡早期,，細胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側翻向外側。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,，故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一,。將Annexin V 進行熒光素（EGFP,、FITC）標記，以標記了的Annexin V 作為熒光探針,，利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發(fā)生,。與FITC 的綠色熒光信號相比,，EGFP 的綠色熒光信號具有信號強，不易淬滅,，穩(wěn)定性高等優(yōu)點,，故本試劑盒采用EGFP作為熒光標記探針。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料,，它不能透過完整的細胞膜,，但對凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核染紅,。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。 |
注意事項：
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,，不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,，否則將會增加空白吸收,，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,，用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大,，則需要除去培養(yǎng)基,，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。
9,、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可,。
金屬硫蛋白2(MT-2)elisa試劑盒英文名稱：MT-2 ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶12包裝250mg
金屬硫蛋白1(MT-1)elisa試劑盒英文名稱：MT-1 ELISA Kit磷酸化乙酰羧化酶1ACCα抗體包裝5g
解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)elisa試劑盒英文名稱：ADAM9 ELISA Kit膜粘連蛋白2受體抗體包裝100ml
解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)elisa試劑盒英文名稱：ADAM8 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體包裝1g
解脲脲原體抗體(UU-Ab)elisa試劑盒英文名稱：UU-Ab ELISA KitADCK5蛋白抗體包裝5g
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)elisa試劑盒英文名稱：CNTF ELISA Kit艾滋病病復制結合蛋白抗體包裝1g
結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa試劑盒英文名稱：Hpt/HP ELISA KitAFP4b蛋白抗體包裝5g
結締組織生長因子(CTGF)elisa試劑盒英文名稱：CTGF ELISA KitHIV-1病復制結合蛋白2抗體包裝100g
結蛋白(Des)elisa試劑盒英文名稱：Des ELISA Kit伴侶蛋白bc1同源復合體抗體包裝25g
窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa試劑盒英文名稱：Cav-1 ELISA Kit心肌錨蛋白重復結構域1抗體包裝5g
角化細胞生長因子(KGF/FGF-7)elisa試劑盒英文名稱：KGF/FGF-7 ELISA Kit抑制蛋白結構域蛋白1抗體包裝25g
角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒英文名稱：AR ELISA Kit抑制蛋白結構域蛋白2抗體包裝5g
膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒英文名稱：Collagenase II ELISA Kit抑制蛋白結構域蛋白3抗體包裝1g
膠原酶I(Collagenase I)elisa試劑盒英文名稱：Collagenase I ELISA Kit抑制蛋白結構域蛋白4抗體包裝5g
膠原吡啶交聯(lián)(PYD)elisa試劑盒英文名稱：PYD ELISA Kit雌二抗體包裝1g
磷酸化通道蛋白2抗體促腎上腺皮質激素(ACTH)Oxiracetam, a cyclic derivative of gamma-aminobutyric acid (GABA), is used as a
Annexin V-EGFP/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒正丙醇胺
其他 3-氨基-1-丙醇；3-氨基丙醇,；3-羥基丙胺,；γ-丙醇胺；3-丙醇氨,；3-胺-1-丙醇
英文名稱： 3-Amino-1-propanol
其他英文名稱： 3-Aminopropyl alcohol ,；Propanolamine
產(chǎn)品規(guī)格： CP，99%
包裝：250毫升
CAS號：156-87-6
C3H9NO=75.11
級別：CP
含量：≥99.0%
干燥失重：≤0.10%
沸點：185.5～188.5℃（95%）
密度（20℃）：0.974～0.990
折光率：1.460～1.462
性狀：無色液體,。能與水、醇、醚和混溶,。有吸濕性,。略帶氨味
用途：生化研究。有機合成
保存：RT,，避光
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