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細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)

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更新時間:2022-04-20 10:06:39瀏覽次數(shù):312

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10T|20T|50T|100T
貨號 FS-X9584 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)公司*的商品:水貂IgG (親和純化)胡蘿卜素Human, Mouse, Rat
(親和純化) 大鼠IgG獨活(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
(親和純化) 大鼠IgM味(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
炭疽沉淀素血清(馬來源)杜鵑素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
健康皮張?zhí)烤铱乖胖伲?biāo)準(zhǔn)品)Human
兔抗抗血清杜仲葉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

詳細介紹

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測,。

產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)

JC-1 Apoptosis Detection Kit

10T|20T|50T|100T

1~3天

商品介紹:

本試劑盒可應(yīng)用于細胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測,。大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關(guān),,其中線粒體跨膜電位(△?)的破壞,被認為是細胞凋亡級聯(lián)反應(yīng)過程中最早發(fā)生的事件之一,,它發(fā)生在細胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮,、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,,則細胞凋亡不可逆轉(zhuǎn),。

本試劑盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一種陽離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),,在低濃度時以單體的形式存在,,高濃度時以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,,但均可在流式細胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,,JC-1可透過正常細胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),正常健康線粒體的膜電位(△?)具有極性,,JC-1依賴于△?的極性被迅速攝入線粒體內(nèi),,并因濃度增高而在線粒體內(nèi)形成多聚體,多聚體發(fā)射光為紅色熒光,;可被流式細胞儀的紅色(FL-2)通道檢測到,,而細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,。根椐這一特征檢測線粒體膜電位的變化,。


注意事項

1. 微量試劑取用前請離心集液。

2. JC-1 避光保存及使用,。

3. 細胞培養(yǎng)至匯合度80-90%,,收集細胞量在1×106/Test。

4. 對PH 變化過于敏感的細胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,,或延長觀測時間,。

5. 流式細胞儀檢測線粒體膜電位變化受到多種因素的影響,因誘導(dǎo)劑、細胞株類型,,作用時間的不同而熒光強度比例都有不同,,因此沒有通用標(biāo)準(zhǔn)的補償設(shè)門指南,因此每個試驗需設(shè)陰性及陽性對照組進行熒光補償及設(shè)門,。

6. 組織需先制備單細胞懸液或提取純化線粒體后方可進行檢測,,可選用我司細胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二,、免疫熒光鑒定:

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;

2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;

5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;

6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa試劑盒英文名稱:BMG/β2-MG ELISA Kit白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體包裝25mg

β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa試劑盒英文名稱:β2-GP1 IgA/G/M ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體包裝500mg

α羥基丁脫氫酶(αHBDH)elisa試劑盒英文名稱:αHBDH ELISA KitBCL7B蛋白抗體包裝1g

α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒英文名稱:α-glucosidase ELISA Kit堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體包裝250mg

α葡萄糖苷酶(a-Glu)elisa試劑盒英文名稱:a-Glu ELISA KitB白血病/淋巴瘤蛋白7抗體包裝5g

α-黑色素細胞刺激素(α-MSH)elisa試劑盒英文名稱:α-MSH ELISA Kit先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)包裝1g

α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)elisa試劑盒英文名稱:α-GST ELISA KitB遷移基因1抗體包裝5g

α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒英文名稱:IFN-α ELISA Kit脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白BEAN1抗體包裝1g

α干擾素(IFNα)elisa試劑盒英文名稱:IFNα ELISA KitB7H6蛋白抗體包裝1g

α甘露糖苷酶(α Manase)elisa試劑盒英文名稱:α Manase ELISA KitB特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5MG

α半乳糖基抗原(α-Gal)elisa試劑盒英文名稱:α-Gal ELISA Kit橋連整合因子蛋白抗體包裝1g

αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)elisa試劑盒英文名稱:αNAG ELISA KitBADH2抗體(稻)包裝25g

αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa試劑盒英文名稱:AFU ELISA Kit丁酰膽堿酯酶單克隆抗體包裝5g

αL艾杜糖苷酶(IDUA)elisa試劑盒英文名稱:IDUA ELISA Kit磷化β 連環(huán)素蛋白抗體包裝1g

α2纖溶酶抑制物(α2-PI)elisa試劑盒英文名稱:α2-PI ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體包裝25g

磷化內(nèi)收蛋白a1抗體基質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)KY02111 promotes differentiation of hPSCs to cardiomyocytes by inhibiting Wnt si
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)油紅O

其他1-[2,5-二甲基-4-(2,5-二偶氮)偶氮]-2萘酚,;5B,;溶劑紅27;紅油O,;1-[[4-[(二基)偶氮]二基]偶氮]-2-萘酚

英文名稱:Oil red O

其他英文名稱:Solvent Red 27,;1-(2,5-Dimethyl-4-(2,5-dimethylphenylazo)phenylazo)-2-naphthol

產(chǎn)品規(guī)格:高純,75%

包裝:10克/100克/500克

CAS號:1320-06-5

C26H24N4O=408.49

級別:High purity grade

含量:≥75.0%

吸光度試驗Absorbency test:Pass

薄層層析試驗TLC test:Pass

水溶解試驗Solubility (0.1%, Water):合格

性狀:波爾多紅至暗紅或棕色粉末,,溶于水和乙,,水溶液呈玫紅色,。大吸收波長520(352) nm。有刺激性

用途:生化研究,。生物染色,,乙纖維素上電泳后的蛋白質(zhì)帶快速染色。麗春紅S用于對硝纖維素或PVDF膜(Western blots)上的蛋白質(zhì)進行染色,,下面是常用的染色溶液配制:0.1% 麗春紅S (w/v) in 5% acetic acid,;2% 麗春紅S (w/v) in 30% TCA;30% sulfosalicylic acid

保存:RT

 


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