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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-20 10:06:39瀏覽次數(shù)：284
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10T|20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | FS-X9584 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布,；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）,；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JC-1 Apoptosis Detection Kit | 10T|20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒可應(yīng)用于細(xì)胞,、組織或純化的線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)。大量的研究表明線(xiàn)粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),，其中線(xiàn)粒體跨膜電位（△?）的破壞,，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中最早發(fā)生的事件之一，它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮,、DNA斷裂）出現(xiàn)之前,，一旦線(xiàn)粒體跨膜電位崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn),。 本試劑盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一種陽(yáng)離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測(cè)線(xiàn)粒體跨膜電位指示劑,。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)，在低濃度時(shí)以單體的形式存在,，高濃度時(shí)以多聚體形式存在,，兩者的發(fā)射光譜不同，但均可在流式細(xì)胞儀綠色（FL-1）通道檢測(cè)出綠色熒光,，JC-1可透過(guò)正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),，正常健康線(xiàn)粒體的膜電位（△?）具有極性，JC-1依賴(lài)于△?的極性被迅速攝入線(xiàn)粒體內(nèi),，并因濃度增高而在線(xiàn)粒體內(nèi)形成多聚體,，多聚體發(fā)射光為紅色熒光；可被流式細(xì)胞儀的紅色（FL-2）通道檢測(cè)到,，而細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),，線(xiàn)粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線(xiàn)粒體內(nèi)釋放,，紅光強(qiáng)度減弱,，以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,。根椐這一特征檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位的變化。 |
注意事項(xiàng)
1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液,。
2. JC-1 避光保存及使用,。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度80-90%，收集細(xì)胞量在1×106/Test,。
4. 對(duì)PH 變化過(guò)于敏感的細(xì)胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,，或延長(zhǎng)觀測(cè)時(shí)間。
5. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位變化受到多種因素的影響,，因誘導(dǎo)劑、細(xì)胞株類(lèi)型,，作用時(shí)間的不同而熒光強(qiáng)度比例都有不同,，因此沒(méi)有通用標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)償設(shè)門(mén)指南，因此每個(gè)試驗(yàn)需設(shè)陰性及陽(yáng)性對(duì)照組進(jìn)行熒光補(bǔ)償及設(shè)門(mén),。
6. 組織需先制備單細(xì)胞懸液或提取純化線(xiàn)粒體后方可進(jìn)行檢測(cè),，可選用我司細(xì)胞懸液制備試劑盒或線(xiàn)粒體提取試劑盒。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：BMG/β2-MG ELISA Kit白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體包裝25mg
β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：β2-GP1 IgA/G/M ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1（型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8）抗體包裝500mg
α羥基丁脫氫酶(αHBDH)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：αHBDH ELISA KitBCL7B蛋白抗體包裝1g
α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α-glucosidase ELISA Kit堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體包裝250mg
α葡萄糖苷酶(a-Glu)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：a-Glu ELISA KitB白血病/淋巴瘤蛋白7抗體包裝5g
α-黑色素細(xì)胞刺激素(α-MSH)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α-MSH ELISA Kit先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體（常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17）包裝1g
α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α-GST ELISA KitB遷移基因1抗體包裝5g
α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：IFN-α ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體包裝1g
α干擾素(IFNα)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：IFNα ELISA KitB7H6蛋白抗體包裝1g
α甘露糖苷酶(α Manase)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α Manase ELISA KitB特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5MG
α半乳糖基抗原(α-Gal)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α-Gal ELISA Kit橋連整合因子蛋白抗體包裝1g
αN已?；咸擒彰?αNAG)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：αNAG ELISA KitBADH2抗體(稻)包裝25g
αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：AFU ELISA Kit丁酰膽堿酯酶單克隆抗體包裝5g
αL艾杜糖苷酶(IDUA)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：IDUA ELISA Kit磷化β 連環(huán)素蛋白抗體包裝1g
α2纖溶酶抑制物(α2-PI)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：α2-PI ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體包裝25g
磷化內(nèi)收蛋白a1抗體基質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)KY02111 promotes differentiation of hPSCs to cardiomyocytes by inhibiting Wnt si
細(xì)胞凋亡線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)油紅O
其他1-［2,5-二甲基-4-(2,5-二偶氮)偶氮］-2萘酚,；5B；溶劑紅27,；紅油O,；1-[[4-[(二基)偶氮]二基]偶氮]-2-萘酚
英文名稱(chēng)：Oil red O
其他英文名稱(chēng)：Solvent Red 27；1-(2,5-Dimethyl-4-(2,5-dimethylphenylazo)phenylazo)-2-naphthol
產(chǎn)品規(guī)格：高純,，75%
包裝：10克/100克/500克
CAS號(hào)：1320-06-5
C26H24N4O=408.49
級(jí)別：High purity grade
含量：≥75.0%
吸光度試驗(yàn)Absorbency test：Pass
薄層層析試驗(yàn)TLC test：Pass
水溶解試驗(yàn)Solubility (0.1%, Water)：合格
性狀：波爾多紅至暗紅或棕色粉末,，溶于水和乙，水溶液呈玫紅色,。大吸收波長(zhǎng)520(352) nm,。有刺激性
用途：生化研究。生物染色,，乙纖維素上電泳后的蛋白質(zhì)帶快速染色,。麗春紅S用于對(duì)硝纖維素或PVDF膜（Western blots)上的蛋白質(zhì)進(jìn)行染色，下面是常用的染色溶液配制：0.1% 麗春紅S (w/v) in 5% acetic acid,；2% 麗春紅S (w/v) in 30% TCA；30% sulfosalicylic acid
保存：RT
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