培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
經(jīng)典膠原纖維染色,,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維,。
注意事項(xiàng):
染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素,。其結(jié)果為:膠原纖維呈藍(lán)色,,胞核呈藍(lán)褐色肌纖維、紅細(xì)胞等呈紅色,。
儲(chǔ)存條件:室溫,,避光,12個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
表告依春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCF1蛋白抗體包裝5g
表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCJ蛋白抗體包裝1g
表沒(méi)食子兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid抑制結(jié)合蛋白抗體包裝25g
表沒(méi)食子兒茶沒(méi)食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid免疫球蛋白超家族成員3抗體包裝5g
表木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Stanolone/Androstanolone免疫球蛋白超家族成員6抗體包裝1g
表小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doramectin免疫球蛋白超家族成員9抗體包裝1g
別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine免疫球蛋白超家族成員10抗體包裝5g
濱蒿內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corylifol A大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體包裝1g
檳榔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium干擾α受體抗體包裝25g
檳榔花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium磷化干擾α受體抗體包裝5g
波棱瓜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupenthixol dihydrochloride磷化胰島受體β抗體包裝1g
波棱英文名稱: Tea polyphenol核因子κB抑制蛋白E抗體包裝5g
博落回(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrahydrocurcumin磷化整合β4抗體包裝1g
薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tubuloside A磷化整合β4抗體包裝10MG
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-AcetylacteosideIQCD蛋白抗體包裝100g
伯克霍爾德氏菌Burkholderia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品醌NADH脫氫1試劑盒葫蘆巴堿;Trigonelline
魯錐梗孢Dissoconium│luensis G.Y. Sun X.R.Zhai& Rong Zhang 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11試劑盒紅花八角;Dunnianol
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空泡相關(guān)蛋白A試劑盒紅松內(nèi)酯;Pinusolide
Masson三色染色液(固綠法)羧甲
其他 羧甲基淀粉鈉;淀粉甘鈉;淀粉羧甲基醚鈉鹽,;淀粉乙鈉,;速崩王;羥基乙淀粉鈉
英文名稱: CMS
其他英文名稱: Sodium starch glycolate,;Sodium carboxymethyl starch,;Sodium carboxyl methylstarch
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包 裝: 500克
CAS號(hào):9063-38-1
級(jí)別:BR
PH:5.5~7.5
干燥失重:≤10.0%
重金屬:≤2ppm
鐵鹽:≤0.002%
性狀:或黃色粉末,無(wú)臭,、無(wú)味,、無(wú)毒、熱易吸潮,。溶于水形成膠體狀溶液,,對(duì)光、熱穩(wěn)定,。不溶于乙,、等有機(jī)溶劑。 其水溶液具有良好的粘性,、穩(wěn)定性,、保護(hù)膠體性和成膜性,不易變霉,,在大堿性和弱性 條件下穩(wěn)定,,在強(qiáng)條件下將產(chǎn)生沉淀。 <br>水溶液在堿中較穩(wěn)定,,在中較差,,生成不溶于水的游離,粘度降低,,因此不適用于強(qiáng)性食品,。水溶液在80℃以上長(zhǎng)時(shí)間加熱,則粘度降低,。
用途:生化研究,。與羧甲基纖維(CMC)有相似的性能,具有增稠,、懸浮,、分散、乳化,、粘結(jié),、保水、保護(hù)膠體等多種性能
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