培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
肌纖維,、纖維素的染色,,尤其適用于橫紋肌/平滑肌染色
注意事項(xiàng):
染色液采用化學(xué)氧化法使其成熟,但保存時(shí)間短,,染色力同自然氧化法,。橫紋肌的橫紋,、纖維素、胞核,、紅細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)纖維呈深藍(lán)色,,膠原纖維,、軟骨呈棕紅色。
儲(chǔ)存條件:室溫,,避光,,6個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Prosapogenin CP6英文名稱: MagnesonII白介16抗體包裝1g
Raddeanoside 20英文名稱: Ferron抑制βB/Inhibin β B抗體包裝250mg
Sapindoside A英文名稱: 3-Methyl-2-benzothialinone白介11抗體包裝1g
Smyrindioloside英文名稱: Miglitol白介22受體抗體包裝5g
Thonningianin A英文名稱: Miglitol白介26抗體包裝1g
Tokinolide B英文名稱: 1-Naphtholphthalein白介-17D抗體包裝25g
Triptonine B英文名稱: Dapoxetine hydrochloride環(huán)指蛋白217抗體包裝5g
α-倒捻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dapoxetine hydrochloride白介2抗體(人)包裝1g
α-蒎烯英文名稱: Fast Black K Salt白介-23受體抗體包裝500mg
α-乳香英文名稱: Amido black 10B胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
α-石竹烯英文名稱: Naltrexone hydrochloride白介6受體β抗體IL-6Rβ包裝1g
α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triphenylarsine oxide干擾-gamma受體1抗體包裝25g
α-香附(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone白介1α前肽/IL-1α前肽抗體包裝5g
α-常春藤皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aloin B整合α11抗體包裝1g
β,β-二基烯酰阿卡寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside胰島生長(zhǎng)因子樣家族成員2抗體包裝5g
弗氏志賀菌Shigella│flexneri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR利什曼原蟲試劑盒L-精;L(+)-Arginine
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,可用于培養(yǎng)利尿肽試劑盒積雪草;Asiatic acid
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR李斯特菌抗體試劑盒金雀花堿;Cytisine
Mallory PTAH染色液(化學(xué)氧化法)羧肽A(牛胰)
英文名稱:Carboxypeptidase A from bovine pancreas
其他英文名稱:Carboxypolypeptidase,; Peptidyl-L-amino-acid hydrolase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,50u/mg
包裝:500U
CAS號(hào):11075-17-5
分子量:~35 kD
級(jí)別:BR
類型:Type I
活力:~50 units/mg protein
活力定義:One unit will hydrolyze 1.0 μmole of hippuryl-L-phenylalanine per min at pH 7.5 at 25 ℃
性狀:灰褐色懸浮液
用途:生化研究。羧肽A能釋放除脯,、羥脯,、精和賴之外的所有C末端基,更易于水解具有芳香族側(cè)鏈和大脂肪側(cè)鏈的羧基端基
PH:7.9
等電點(diǎn)PI:6.0
Chymotrypsin and trypsin:≤0.02%
產(chǎn)品描述:Catalyzes hydrolysis of the basic amino acids lysine,arginine and ornithine from the C-terminal position in polypeptides.A solution in 100mM sodium chloride.PMSF treated to inhibit tryptic and chymotryptic activities.
級(jí)別:Chromatographically purified
活力:≥170units/mg
性狀:粉末。以原形式存在于生物體內(nèi)
性狀:粉末或膠體或液體,,A solution in 100mM sodium chloride,。以原形式存在于生物體內(nèi)
用途:生化研究??蓪R恍缘貜碾逆湹?/span>C端開始逐個(gè)降解,,釋放出游離基的一類肽鏈外切。羧肽B只水解以堿性基(如精和賴)為C末端殘基的肽鍵,。
保存:-20℃