中文名稱:AO/EB雙染試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
AO/EB雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測(cè)細(xì)胞的狀態(tài),。橙(AO)具有膜通透性,,能透過(guò)細(xì)胞膜,,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為488nm,,吸收波長(zhǎng)為515nm,。它與細(xì)胞中DNA和RNA 結(jié)合量存在差別,復(fù)合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm),。因此,,在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜,,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,,形成凋亡小體,。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒,;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失,。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染,因EB 只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。 |
儲(chǔ)存條件:A液和B液-20℃避光保存,。C液2-8℃保存,。
有效期:一年。
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
托瑞米芬英文名稱: Cyclosporine A磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
拓?fù)涮婵蝶}鹽英文名稱: Ticlopidine HCl磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
維酰酚英文名稱: Ticlopidine HCl胸腺基質(zhì)淋巴生成受體抗體包裝25g
維羅非尼,RG7204英文名稱: Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g
戊柔比星英文名稱: Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
西地尼布;AZD2171英文名稱: Cytarabine蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
西地尼布馬來(lái)鹽英文名稱: Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
亞葉鈣英文名稱: Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
鹽阿糖胞苷英文名稱: Dasatinib胰輔脂抗體包裝5g
鹽埃羅替尼英文名稱: Dasatinib19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體包裝5MG
鹽昂丹司瓊英文名稱: Daptomycin過(guò)氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體包裝5MG
鹽達(dá)莫司汀英文名稱: Daptomycin核因子NFκB激活蛋白1抗體包裝100g
鹽表阿霉英文名稱: Daunorubicin HCl第12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體包裝25g
鹽多柔比星/鹽阿霉英文名稱: Daunorubicin HClγ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體包裝5g
鹽米托蒽醌英文名稱: Daunorubicin HCl10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體包裝100g
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定胰島受體底物2試劑盒鹽拓?fù)涮婵?Topotecan hyd
膠孢炭菌Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%胰島受體底物1試劑盒延齡草苷;Diosgenin gluco
小珊瑚球菌Corallococcus│exiguus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島受體β試劑盒異槲皮;Isoquercitrin
AO/EB雙染試劑盒氧嗪鉀
其他1,4,5,6-四氫-4,6-二氧-1,3,5-三嗪-2-羧鉀;草酰鉀,;4,6-二羥基-1,3,5-噻嗪-2-羧鉀鹽,;氧氫鉀;奧替拉西鉀
英文名稱:Potassium oxonate
其他英文名稱:Oxonic acid potassium salt,;Potassium 1,4,5,6-tetrahydro-4,6-dioxo-1,3,5-triazine-2-carboxylate,;4,6-Dihydroxy-1,3,5-triazine-2-carboxylic acid potassium salt
產(chǎn)品規(guī)格:BR,,97%
包裝:5克/25克
CAS號(hào):2207-75-2
C4H2KN3O4=195.17
級(jí)別:BR
含量:≥97.0%
熔點(diǎn):≥300℃
性狀:粉末或塊狀物
用途:生化研究。
保存:RT,,避光,。